矢车菊素-3-葡萄糖苷干预UVB损伤HaCaT细胞ROS/COX-2通路的初步研究

【目的】探究矢车菊素-3-葡萄糖(C3G)对UVB损伤HaCaT细胞的ROS/COX-2通路的干预机制。【方法】1、MTT法与化学发光法结合筛选致HaC aT细胞氧化损伤的UVB剂量。2、倒置显微镜观察C 3G对UVB照射的HaCaT细胞形态学改变。3、MTT法检测C3G对UVB照射的HaC aT细胞存活情况的影响。4、化学发光法检测C3G对UVB照射的HaCaT细胞内活性氧(reactie oxygen species,ROS)水平的影响。5、West ern blot法检测C3G对UVB照射HaCaT细胞COX-2及其相关蛋白表达的影响。【结果】1、建立以300 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞的光氧化损伤模型。2、C 3G(80～200μmol/L)使UVB导致细胞损伤的形态表现减轻。3、80～200μmol/L C 3G能提高UVB照射后12小时的细胞存活率(P<0.05)。4、80～200μmol/L C3G可显著降低UVB照射后细胞内的R OS水平(P<0.05)。5、80～200μmol/L C3G及80μmol/L塞来昔布均可降低光氧化损伤模型COX-2、p-EGFR、p-ERK、p-p38、p-JN K和p-Akt的表达。【结论】1、UVB可引起HaCaT细胞的氧化损伤。2、UVB通过诱导ROS的产生增多,激活EFGR,从而促进ERK、p38、JNK和Akt的磷酸化,调节COX-2的表达,推测UVB通过ROS/COX-2通路造成HaCaT细胞损伤。3、C3G可减少UVB引起HaCaT细胞的ROS生成,保护细胞的增殖活性,减轻氧化损伤。4、C3G通过抑制ROS水平,干预UVB损伤HaCaT细胞的ROS/COX-2通路,从而抑制COX-2的表达。