本课题来源于山东省中医心脑血管疾病临床研究中心资助。目的:探讨乌梅丸治疗原发性高血压上热下寒证的临床疗效、主要作用通路、相关靶点及内在机制,以期为乌梅丸的临床用药提供理论及实践依据。方法:1.临床疗效观察:收集原发性高血压上热下寒证患者72例,随机分为对照组和试验组,每组36例,对照组予缬沙坦胶囊治疗,试验组予缬沙坦胶囊联合乌梅丸治疗,干预4周,分别于治疗前、后观察两组患者在血压数值、证候积分等方面的改善情况。2.网络药理学研究:基于各数据平台聚合乌梅丸中所有药物的成分、靶点,筛选关键成分;于各数据库取得原发性高血压疾病靶点,利用韦恩图将两部分靶点映射;利用STRING、DAVID数据库获取映射结果的互作关系和富集通路,获得乌梅丸降压作用的通路及关键靶点。3.关键靶点表达量验证:收集试验组及对照组,治疗前、后的血清进行EL ISA实验,观察乌梅丸对关键靶点(VEGFA、EGFR、CXCL8、NOS 3、CXCL10)蛋白表达的影响。结果:1.临床疗效观察:乌梅丸能对缬沙坦胶囊治疗原发性高血压上热下寒证的临床疗效起到辅助、增强作用,改善试验组患者的血压数值和证候积分,效果优于对照组(P<0.05),且具有良好的安全性。2.网络药理学:共获得乌梅丸活性成分115个,匹配靶点280个,网络拓扑分析提示关键成分有11个。获得高血压相关靶点2455个,经映射得到186个乌梅丸降压作用的潜在靶点,提取11个关键靶点进行分子对接验证,表明各关键成分和各靶点之间均能较好的结合。富集分析中高血压相关的通路涉及经典的PI3K-Akt、MAPK、Ca2+信号传导通路,FoxO、HIF-1等能量代谢通路,作用于中枢神经系统的ErbB信号通路,以及免疫方面的TNF、Toll受体信号通路,以及与血管重塑密切相关的平滑肌收缩和血管内皮生长因子信号通路,同时富集到调节水钠平衡的醛固酮-钠重吸收通路等,还涉及细胞凋亡、细胞周期等细胞过程及细胞外基质改变。拟对部分关键靶点进行后续验证。3.关键靶点验证:治疗前,试验组和对照组患者血清中的各靶点无差异性,经4周药物干预治疗,结果表明:上述关键靶点中VEGFA、EGFR、CXCL8、CXCL10表达下调,NOS3的表达上调,且试验组对除CXCL8外关键靶点的干预效果优于对照组(P<0.05)。结论:乌梅丸治疗原发性高血压上热下寒证临床疗效确切且无明显不良反应,初步发现其降压作用机制与下调VEGFA、EGFR、CXCL8、CXCL10的表达,上调NOS3的表达有关,涉及血管重塑、免疫调节等生物学过程。本研究为乌梅丸治疗原发性高血压的临床推广应用提供了理论支持和临床依据。
