云茯苓化学指纹图谱研究

中药质量评价是保证其安全性和有效性的重要前提,药用资源质量安全可控有利于药材品质从源头上得到保障,建立符合中医药特点的质量评价技术已成为推进中药现代化和国际化发展的首要任务之一。药用资源特有属性依赖于所含化学成分的复杂性及生物活性物质种类的多样性,易受环境因素影响,导致品质具有差异。化学指纹图谱技术基于对物质群整体作用的认识,能较充分反映复杂混合体系特征性成分种类及含量的整体状况,在药用资源产地鉴别、质量评价等方面应用较为广泛。本论文以云南道地药材茯苓(Wolfiporia extensa (Peck) Ginns)为研究对象,采用紫外光谱法、傅里叶变换红外光谱技术、超高效液相色谱法建立茯苓化学指纹图谱,辅以化学计量学方法解析不同产地、部位、野生及栽培茯苓样品图谱化学信息,探讨样品间的差异与联系,系统评价茯苓质量,为茯苓资源的深入研究和合理开发利用提供基础数据,同时为茯苓资源质量评价体系的构建提供参考。采用氯仿提取来源于云南楚雄、红河以及普洱地区的野生茯苓样品,构建茯苓低极性成分紫外特征指纹图谱,结合偏最小二乘判别分析和聚类分析对样品进行研究,结果表明,产地对茯苓中低极性成分的累积具有一定影响,依据低极性成分紫外光谱信息能够对产地进行准确鉴别。利用傅里叶变换红外光谱技术构建不同产地野生茯苓指纹图谱,获取整体化学成分信息,结合主成分分析和聚类分析探讨样品间的差异,结果表明,产地对茯苓化学成分具有一定影响,不同产地的样品具有明显差异,所有样品能够按照产地来源进行区分；采样地点的海拔可能与野生茯苓化学成分的累积相关,野生茯苓化学成分因海拔不同而具有差异。采用紫外指纹图谱技术结合超高效液相色谱法对采自云南5个地区野生茯苓样品进行质量评价研究,测定指纹图谱的同时,对茯苓酸进行量化分析,拟合指纹图谱数据和茯苓酸含量数据,辅以偏最小二乘判别分析和聚类分析从整体角度探讨不同部位野生茯苓质量与产地的关系,结果表明,不同产地、部位样品之间化学组成和茯苓酸含量具有差异,茯苓不同部位化学成分和含量的差异大于采自不同产地相同部位样品的差异；产地来源对茯苓皮中化学成分的影响大于对白茯苓的影响：同一产地的样品,其质量亦存在差异。如要获得质量相对稳定一致的茯苓原药材,采样地点应当相对统一。基于仪器联用技术对茯苓品质进行分析,包含较丰富的样品信息,可作为一种系统评价茯苓资源的方法。结合红外光谱与超高效液相色谱技术的优势特征,对云南不同产地栽培茯苓进行质量评价,同时辅以偏最小二乘判别分析和聚类分析,对拟合数据进行解析。结果表明,栽培茯苓皮中化学成分可能与其生长环境的土壤有关,产地土壤颜色相同的样品,质量差异较小；在选择茯苓栽培产地时,可以考虑土壤性质对其的影响。此外,产地土壤颜色不同的白茯苓也会聚为一类,以此推测,土壤性质对茯苓皮和白茯苓成分的影响不一致。对不同药用部位分析发现,对于栽培茯苓而言,白茯苓的质量比茯苓皮有更好的一致性。采用傅里叶变换红外光谱结合超高效液相色谱法对云南野生、栽培茯苓进行质量评价,通过两种仪器的优势特征,辅以偏最小二乘判别分析初步研究野生与栽培茯苓品质的差异与联系,结果表明,野生与栽培茯苓样品质量差异较大,无论是茯苓皮还是白茯苓,均能较好区分；不同部位野生茯苓的差异较明显,栽培样品差异相对较小,推测可能由样品生长环境以及人为因素造成。