组织工程方法构建全生物化血管移植物的实验研究

目的：血管移植物已经常规应用于治疗心血管疾病，但是自体动静脉来源不足，数量有限，不适用于大口径血管和多次移植手术，合成材料作为血管替代物容易形成血栓，尤其不适用于小血管。鉴于这些问题，很多研究试图利用生物材料和自体细胞构建出组织工程血管。脱细胞基质是一种重要的材料，具有较低的免疫原性，良好的生物相容性，较强的机械和生理特性。内皮细胞可以分泌抗血栓因子，对于维持血管功能具有不可替代的作用。本课题试图用组织工程的方法，体外培养血管内皮祖细胞(endothelial progenitot cells，EPCs)，种植到脱细胞基质上，构建出组织工程血管，并移植到细胞供体山羊体内，研究是否可以用于构建血管移植物并希望通过此项研究为组织工程血管临床应用提供实验基础。 方法： 1) 抽取山羊外周血，通过密度梯度法培养的血管内皮祖细胞，摸索体外培养条件，并应用电镜、免疫细胞化学等方法检测EPCs的生长特性、细胞表面标志物和定向分化能力。 2) 观察去垢剂、胰蛋白酶、机械法等对山羊颈动脉去细胞的影响，探讨血管组织工程生物支架的最佳制备方法。 3) 将制备的脱细胞血管支架植入山羊皮下，及在体外种植EPCs，观察脱细胞血管支架的生物相容性。