用代谢组学方法评价复方丹参片对血瘀动物的作用

整体性思维是中医药诊断和治疗疾病的基本思维模式,而现有的中药药效评价方法多照搬西药的评价方法,采用单一或少数几个病理指标的变化来评价中药的药效,这对于作用机制以单途径、单靶点为主的西药来说是顺理成章的,但却违背中医药整体性思维的理论,难以客观地反映中药的实际治疗效果,因为中药治疗疾病的特点是多途径、多靶点,注重对机体的整体协调。以西药的评价方法评价中药的药效,往往由于中药起效慢,治疗靶点不明确等因素,导致对中药的药效判定不够全面和客观,也不符合中药治疗疾病的基本理论原则。所以,探索基于机体整体功能性变化的药效评价方法可能更符合中医药的思想理论,也是对现有的中药药效评价模式的补充和优化。 代谢组学作为系统生物学的一个重要分支,是通过考察生物体内代谢产物的整体性变化来研究机体内的代谢途径,这与中药整体性治疗的思想相统一,为我们从整体上评价中药的药效提供了一个很好的技术平台。 本文采用冰水刺激加皮下注射盐酸肾上腺素的方法建立了血瘀动物模型,从病理实验和代谢组学两方面评价了复方丹参片对血瘀动物的作用,主要进行了以下工作： 1、建立大鼠血瘀模型,通过检测大鼠血液流变学的指标评价复方丹参片对血瘀大鼠的作用。结果显示,模型组大鼠的血液流变学指标,即全血黏度、血浆黏度、红细胞压积和纤维蛋白原含量均显著升高,与对照组相比较有显著性差异(p<0.05)或差异极显著(p<0.01),表明采用冰水刺激加皮下注射盐酸肾上腺素的方法可成功复制出血瘀模型。阿司匹林组的血浆黏度和纤维蛋白原含量、复方丹参低剂量组的血浆黏度、红细胞压积和纤维蛋白原含量以及复方丹参高剂量组的全血黏度(剪切速率分别为1.00s-1和200.00s-1时)、血浆黏度和纤维蛋白原含量与模型组相比较均有明显的改善,差异具有显著性(p<0.05)或差异极显著(p<0.01)。复方丹参低剂量组与阿司匹林组相比较,各指标均无显著性差异；而高剂量的复方丹参片对全血黏度、血浆黏度和纤维蛋白原含量的改善作用优于阿司匹林肠溶片,二者的差异具有显著性(p<0.05)或差异极显著(p<0.01)。实验表明,复方丹参片能有效抑制血瘀对大鼠血液流变学指标的影响,其低剂量的作用与阿司匹林肠溶片效果相当,但高剂量的作用优于阿司匹林肠溶片。 2、建立小鼠血瘀模型,通过检测小鼠的凝血时间评价复方丹参片对血瘀小鼠的作用。结果显示,模型组小鼠的凝血时间显著缩短,与对照组相比较差异极显著(p<0.01)。阿司匹林肠溶片和复方丹参片均能显著抑制血瘀对小鼠凝血时间的影响,与模型组相比较差异极显著(p<0.01),但复方丹参组与阿司匹林组相比较并无显著性差异。实验表明,复方丹参片能有效延长血瘀小鼠的凝血时间,其作用与阿司匹林肠溶片效果相当。 3、采用基于气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)的代谢组学方法评价复方丹参片对血瘀小鼠血浆代谢谱的作用。结果显示,与对照组相比较,模型组小鼠的血浆代谢谱发生了明显的变化,其中,丙氨酸、缬氨酸、苹果酸和花生四烯酸的含量显著升高,与对照组相比较有显著性差异(p<0.05)或差异极显著(p<0.01)。阿司匹林肠溶片和复方丹参片均能明显抑制血瘀对小鼠血浆中丙氨酸、缬氨酸、苹果酸和花生四烯酸含量的影响,与模型组相比较有显著性差异(p<0.05)或差异极显著(p<0.01)。但在复方丹参组中,仅花生四烯酸的含量显著低于阿司匹林组(p<0.01),丙氨酸、缬氨酸和苹果酸的含量与阿司匹林组相比较均无显著性差异。说明复方丹参片能有效改善血瘀小鼠血浆中代谢产物的变化,对于花生四烯酸,其作用优于阿司匹林肠溶片,但对于丙氨酸、缬氨酸和苹果酸,其作用与阿司匹林肠溶片效果相当。 上述结果表明,代谢组学的研究结果与病理实验的综合结果相一致,且能更全面地反映生物体的代谢状态,在中药的整体性药效评价研究中具有很好的应用价值。