白毛藤多糖的提取及其药效学的初步研究

【研究背景】 中草药具有毒副作用小、药物残留低、不易产生耐药性等特点，是真正的环保型药品。我国虽然拥有世界上品种最多、数量最大的中草药资源，但是还有很多中草药未得到合理开发和充分利用。因此，合理地开发和利用我国中草药资源具有重要意义和光辉的前景。已有研究表明白毛藤具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤和增强免疫的作用。但对白毛藤多糖的研究还不够深入，有关白毛藤多糖的含量测定及从基因水平探讨其免疫增强作用的机制还尚未见报道。【目的】 (1)探索白毛藤多糖的提取工艺。 (2)测定白毛藤多糖的含量。 (3)测定白毛藤多糖的体外抗菌活性。 (4)探讨白毛藤多糖对正常小鼠部分细胞因子mRNA表达的调节。【方法】 (1)采用改良水醇法，从白毛藤中提取多糖，用苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量。 (2)采用杯碟法测定其体外抗菌效果，并采用对倍稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)。 (3)将BALB／c小鼠随机分成4组：自毛藤多糖高(H组)、中(M组)、低(L组)三个剂量组和生理盐水对照组(C组)，连续腹腔注射7d后，用RT-PCR的方法检测小鼠脾脏IL-2、IL-12、TNF-α mRNA表达水平。【结果】 (1)白毛藤多糖的提取结果表明：在100g白毛藤全草粉末中提得水溶性粗多糖干物质为0.9637g。含量测定结果：多糖含量为2.44％，RSD=0.626％。 (2)体外抗菌试验结果表明：白毛藤多糖对大肠杆菌、巴氏杆菌、链球菌、沙门氏菌均有较强的抑菌作用，且抑菌作用的效果随多糖浓度增大而增强：其MIC分别为6.25mg／ml，3.175mg／ml，1.563mg／ml，3.175mg／ml。 (3)白毛藤多糖3个剂量组IL-2 mRNA的表达水平均提高，M组、H组与C组相比具有显著差异((?)＜0.05)；M组、H组与C组相比，IL-12 mRNA表达水平极显著升高((?)＜0.01)；白毛藤多糖L组、M组与C组相比，TNF-α mRNA表达水平均极显著的升高((?)＜0.01)；表明白毛藤多糖在一定剂量范围内能促进IL-2、IL-12、TNF-α三种细胞因子的表达。