苜蓿生物活性及影响其黄酮和皂苷成分因素的研究

紫花苜蓿(Medicago sativa L．)为豆科多年生牧草植物，在民间作为传统草药用于治疗消化不良、肺热咳嗽、黄疸、膀胱结石等症。目前，我国苜蓿种植面积2000多万亩，年干草产量达到2000多万吨，对苜蓿的开发利用研究，主要集中在饲料价值和干革加工技术方面，对其生物活性方面研究很少，因此，目前绝大部分苜蓿是以干草或草粉的形式饲喂畜禽，少部分经过加工的苜蓿叶蛋白也是作为动物营养补充剂，产品的经济附加值较低。丰富的苜蓿资源可能蕴藏着许多潜在的生物活性成分有待开发，因此，本论文对苜蓿的生物活性及影响其黄酮和皂苷成分的因素进行了系统研究，旨在弥补我国在苜蓿资源药用价值研究方面的不足，为指导苜蓿育种、栽培以及合理利用苜蓿资源提供理论依据。 一、紫花苜蓿提取物的生物活性研究 以肉仔鸡为实验动物，在饲料中分别添加300mg／kg、600mg／kg、900mg／kg 3个剂量的苜蓿提取物，实验发现添加600mg／kg、900mg／kg苜蓿提取物能够显著提高(p＜0.05)21～42日龄肉仔鸡体重及日增重；3个剂量组在1～7日龄时，可降低料肉比9.3％～19.6％，从而提高饲料转化率；3个剂量组肉鸡腹脂率降低14.7～28.7％，胸肌率提高9.7％～26.4％。研究发现苜蓿提取物体外对鸡大肠杆菌无抑菌作用，但在体内显著降低鸡肠道内大肠杆菌数量(p＜0.05)，肉仔鸡早期腹泻率比对照降低27.2～55.8％，存活率有所提高；添加300mg／kg、600mg／kg苜蓿提取物对肉仔鸡免疫器官及细胞免疫也有一定的促进作用。 二、苜蓿黄酮、皂苷类成分的影响因素及化学成分研究 建立了苜蓿总黄酮及总皂苷的测定方法，两种方法的精确性、重复性、稳定性及加样回收率等各项指标的RSD值均小于0.05％。在此基础上，从品种、生态型、生育期、采收季节、生长年限、虫害、病害等7个方面，根据231多个样品的测定结果，对影响苜蓿黄酮及皂苷的因素进行了系统的研究，并通过HPLC-MS技术对染病叶片中化合物的变化进行了分析，结果如下： (1)北京地区栽培的45个紫花苜蓿品种中(包括育成品种、地方品种以及栽培面积较大的引进品种)，73.3％的品种总黄酮含量在0.6％～0.9％之间，皂苷含量在0.7％～1.2％之间分布相对较为平均。秋眠级从2～9的6个品种总黄酮、总皂苷含量没有规律性变化，品种的抗寒性与其