宫颈癌是全世界妇女中最常见的恶性肿瘤之一,由于肿瘤细胞的获得性耐药及化疗药物的毒副作用,往往影响宫颈癌综合治疗的总体效果。因此寻找高效低毒的新化疗药物是提高化疗成功率和患者生存率、改善患者生活质量的关键。姜黄素(Curcumin)是从姜科姜黄属植物姜黄的根茎中提取的一种酚类色素,主要药理作用包括抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗凝、降血脂、抗动脉粥样硬化等。姜黄素的体内外抗肿瘤作用及机制是目前治疗肿瘤研究的热点之一,其抗肿瘤机制包括抑制肿瘤细胞的生长和增殖、诱导肿瘤细胞凋亡等。关于姜黄素对宫颈癌细胞作用的研究国内外报道较少,本课题通过研究姜黄素对人宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖和凋亡的影响,探讨姜黄素抗宫颈癌作用的分子机制,为姜黄素临床抗肿瘤的应用提供理论依据。
方法:
1.观察姜黄素对HeLa细胞增殖的影响:10、20、40μmol/L姜黄素分别处理HeLa细胞24h后,应用MTT比色法检测不同浓度姜黄素对HeLa细胞增殖能力的影响。
2.研究姜黄素对HeLa细胞诱导凋亡的作用:光镜观察对照组和实验组HeLa细胞的生长情况、形态学改变,原位末端TdT酶标记技术(TUNEL)检测姜黄素诱导HeLa细胞凋亡的作用。
3.探讨姜黄素诱导HeLa细胞凋亡的分子机制:SP免疫细胞化学法检测姜黄素对HeLa细胞cytochrome C、caspase-9表达的影响,Western blot法检测HeLa细胞XIAP表达的影响。
结果:MTT比色法结果显示姜黄素对HeLa细胞生长有明显的抑制作用,且随药物浓度的升高该抑制作用明显增强,呈剂量依赖性。实验组与对照组比较,吸光度值和抑制率均有统计学差异(P<0.01),各实验组之间的两两比较也有统计学差异(P<0.01)。光镜下部分细胞呈现典型凋亡形态学改变。TUNEL检测可见明显的核呈棕黄色的凋亡细胞。免疫细胞化学分析发现HeLa细胞中cytochrome C、caspase-9的表达随姜黄素浓度的升高而增强。Western blot检测到HeLa细胞的XIAP蛋白水平随姜黄素浓度的升高均较对照组不同程度的下调。
结论:姜黄素可抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡, cytochrome C、caspase-9的表达上调及XIAP的表达下调可能参与凋亡过程。
