电针上巨虚对急性束缚应激大鼠结肠功能的调节作用及中枢机制研究

目的: 以中医针灸学“合治六腑”理论为指导,以大肠下合穴-上巨虚为代表,证实大肠下合穴上巨虚对急性束缚应激大鼠结肠功能障碍的调节作用,探讨其作用的中枢机制,为上巨虚-大肠相关提供实验依据;并通过大肠下合穴(上巨虚)和大肠经合穴(曲池)的比较研究,为针刺治疗应激相关性肠疾病(如肠易激综合征)提供选穴指导。 方法: 40只雄性SD大鼠,随机分为4组:对照组、造模组、应激+电针上巨虚组(上巨虚组)、应激+电针曲池组(曲池组)。除对照组外,各组均进行束缚应激1.5小时。在上述束缚应激1.0小时后,上巨虚组、曲池组分别取上巨虚、曲池进行电针治疗0.5小时。束缚结束后,观察各组结肠小珠排出时间、结肠痛阈变化,免疫组织化学染色法检测蓝斑核(Locus coeurleus,LC)/脊髓L6-S1节段c-fos蛋白表达、LC促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)蛋白表达,原位杂交法检测LC神经元CRH1RmRNA表达变化。 电生理实验选用健康成年SD雄性大鼠40只,用乌拉坦腹腔注射麻醉。采用玻璃微电极胞外记录LC单细胞放电。观察手针上巨虚和曲池对伤害性结肠扩张诱发LC神经元放电反应的影响。 结果: 束缚应激后,与对照组相比,造模组结肠小珠排出时间显著缩短(P＜0.01),结肠痛阈显著降低(P＜0.01);上巨虚组较造模组小珠排出时间显著延长(P＜0.01),结肠痛阈显著提高(P＜0.05);曲池组与造模组相比,二者均无明显变化(P＞0.05),曲池组与上巨虚组相比,二者均差异显著(P＜0.05)。造模组LC/脊髓L6-S1的c-fos平均光密度值较对照组均明显增高(P＜0.01),上巨虚组较造模组二者c-fos平均光密度值均显著降低(P＜0.05),曲池组与造模组比较均无显著性差异(P＞0.05),与上巨虚组相比均差异显著(P＜0.05)。造模组LC神经元CRH/CRH1RmRNA的光密度值均较对照组显著增高(P＜0.05),上巨虚组二者的光密度值较造模组均显著降低(P＜0.05),曲池组与造模组比较二者均无统计学差异(P＞0.05),曲池组与上巨虚组相比,二者均差异显著(P＜0.05)。 针刺上巨虚与曲池均能抑制伤害性结肠扩张激活的LC神经元的放电反应(P＜0.01,P＜0.01),但二者的作用有显著性差异(P＜0.01),针刺上巨虚的抑制作用强于曲池。 结论: 1.电针上巨虚显著改善应激刺激(中枢性)造成的结肠运动亢进和结肠感觉过敏,可用于应激相关性肠疾病(如肠易激综合征)的治疗,效果明显优于曲池。上巨虚-大肠存在特异性联系,“合治内腑”理论具有科学的内涵。 2.LC会聚神经元是上巨虚-大肠相关的重要神经基础。 3.L6-S1脊髓节段、LC可能是应激状态下上巨虚-大肠相关的重要中枢部位,降低L6-S1脊髓节段、LC应激神经元的活化程度,抑制LC神经元CRH/CRH1RmRNA表达,可能是电针上巨虚调节应激大鼠结肠功能的中枢机制之一。