加味黄连温胆汤调控PI3K通路改善代谢综合征大鼠胰岛素抵抗的研究

目的：通过研究加味黄连温胆汤对代谢综合征大鼠各异常组分、脂肪细胞因子及骨骼肌P13K信号通路的干预作用,探讨该方药对MS大鼠脂肪细胞因子与该信号通路的影响,以及二者间的相互作用,并且对加味黄连温胆汤干预该信号通路的机制进行研究。 方法：利用高脂高糖高盐饲料喂养8周龄雄性SD大鼠20周,饲喂20周后,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)。建立MS模型大鼠后,将MS大鼠随机分为5组,即：模型组、西药组、高、中、低剂量组。西药组给予格华止干预；黄连温胆汤高、中、低剂量组予不同剂量的加味黄连温胆汤灌胃；模型组给予蒸馏水灌胃。各组大鼠灌服相应药物4周。实验期间动态测量各组大鼠基础指标,包括：体重、腹围、收缩压、空腹血糖、血清胰岛素、血脂等,并计算HOMA-IR、Lee's指数同时作为筛选模型的评价标准。药物干预后除检测上述指标外,采用比色法测定FFA,放射免疫法测定TNF-α及LEP,利用HE染色及免疫组化法测定大鼠骨骼肌IRS-1、GLUT-4,同时采用RT-PCR检测大鼠骨骼肌IRS-1mRNA表达情况,Western blot法检测大鼠骨骼肌IRS-1、P13K、GLUT-4蛋白表达。 结果： 1.利用高脂高糖高盐饲料饲喂及注射STZ后的大鼠与空白组大鼠相比,大鼠体重、收缩压、空腹血糖、血清胰岛素、TC及TG等指标明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。 2.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠体重、收缩压、Lee's指数、内脏脂肪重量、内脏脂肪体重比、FBG、FINS、HOMA-IR.TG及TC均降低,与模型组相比,均具有统计学意义(P<0.05)。 3.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠FFA、TNF-α、LEP水平与模型组相比显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。 4.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠骨骼肌IRS-1mRNA的表达高于模型组大鼠,且差异具有统计学意义(P<0.05)。 5.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠骨骼肌IRS-1、P13K、GLUT-4蛋白表达水平与模型组相比显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。 6.在相关性研究中发现,FFA、LEP、TNF-α三者与IRS-1均有相关性,且三者与IRS-1均成负相关,以IRS-1与LEP呈负相关最为显著(r=-0.641,P<0.01)。 结论： 1.加味黄连温胆汤具有降低MS大鼠体重、收缩压、血糖、血清胰岛素作用,同时可以调脂、减轻大鼠胰岛素抵抗,但以高剂量效果显著。 2.加味黄连温胆汤在不同程度上降低MS大鼠脂肪细胞因子如：FFA、LEP、TNF-α水平,从而减轻炎症反应。这可能与加味黄连温胆汤可以降重、降糖、调脂、减轻胰岛素抵抗有关。 3.加味黄连温胆汤可以上调MS大鼠骨骼肌IRS-1mRNA表达,进而激活IRS-1-PI3K-GLUT-4信号转导通路,提高大鼠骨骼肌对葡萄糖的吸收与利用水平,改善胰岛素抵抗。 4.加味黄连温胆汤可能通过降低MS大鼠脂肪细胞因子：FFA、LEP、TNF-α水平来上调MS大鼠骨骼肌IRS-1、P13K及GLUT-4蛋白的表达,从而增强MS大鼠骨骼肌胰岛素信号转导,改善糖代谢及IR,这可能是加味黄连温胆汤防治MS的机制之一。