球孢白僵菌D1-5不同分生孢子特异表达蛋白的筛选

本实验对球孢白僵菌D1-5菌株的三种分生孢子的最佳培养条件进行了筛选,结果表明,气生分生孢子在固体PDA培养基中最适培养条件为pH值6.85、26℃下暗培养168h,芽生分生孢子在SDY培养基中培养及深层分生孢子在TKI broth培养基中最适培养条件为pH值6.85、26℃、摇床转速150rpm、250mL锥形瓶装液量为50mL。 表面扫描电镜观察结果显示,三种孢子的外部形态具有明显差异,气生分生孢子具有明显的疏水性,芽生分生孢子具有明显的亲水性,而深层孢子既具有亲水性,又具有疏水性;切片扫描电镜观察结果表明,气生分生孢子同芽生孢子比较,其外部具有明显的疏水圈,说明其外壁可能具有输水蛋白,而芽生孢子由液体培养而来,由于其缺乏输水蛋白,而具有良好的亲水性能。 使用双向凝胶电泳技术对三种分生孢子的差异表达蛋白进行比较,使用PDquest软件对结果进行分析,深层分生孢子与芽生分生孢子蛋白表达图谱相比较获得约1241个蛋白质信息点,其中有20个蛋白质表达量发生2倍以上改变,其中8个蛋白质表达量上调,12个蛋白质表达量下调,3号、5号蛋白为特异表达蛋白;气生分生孢子与芽生分生孢子蛋白表达图谱相比较获得约1304个蛋白质信息点,有57个蛋白质表达量发生2倍以上改变,其中43个蛋白质表达量上调,14个蛋白质表达量下调,1号、3号、6号、50号、60号为特异表达蛋白;深层分生孢子与气生分生孢子蛋白表达图谱相比较其中有66个蛋白质表达量发生2倍以上改变,其中8个蛋白质表达量上调,58个蛋白质表达量下调,27号、37号、38号、39号、53号为特异表达蛋白。