苦参碱是豆科植物苦豆子S.alopecuroides L,苦参Sophora flavescens Ait,广豆根S. subprostrata Chun et T. Chen等中草药的活性成分,具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、抗心律失常、降血脂、平喘等多种药理作用,因此可作为药用植物资源进行开发和利用。由于苦参碱抗炎作用的机制尚未完全阐明,为此,本课题以小鼠免疫性肝损伤为模型,研究苦参碱对BCG加LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其作用机制。
第一部分苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能及免疫器官的影响
目的观察苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能、免疫器官系数的影响。
方法BALB/c雄性小鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组,模型组,联苯双酯组,苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型,正常对照组与模型组给予生理盐水,阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯,药物处理组分别给予20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg苦参碱。除正常对照组外,其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗,第2天起,各给药组以0.1ml/10g灌胃给药,每天1次,连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击,禁食12h。分别观察不同剂量的苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠免疫器官系数的影响。
结果模型组小鼠ALT、AST及免疫器官系数明显升高,与正常对照组相比,差异均具有统计学意义;与模型组相比,苦参碱能够显著降低免疫性肝损伤小鼠ALT、AST及免疫器官系数。
结论苦参碱可降低BCG加LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠的ALT、AST及免疫器官系数。
第二部分苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠抗氧化能力的影响
目的探讨苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量的影响。方法BALB/c雄性小鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组,模型组,联苯双酯组,苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型,正常对照组与模型组给予生理盐水,阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯,药物处理组分别给予20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg苦参碱。除正常对照组外,其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗,第2天起,各给药组以0.1ml/10g灌胃给药,每天1次,连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击,禁食12h。摘取小鼠肝脏,制成10%的肝匀浆,用GSH-Px、T-AOC、MDA检测试剂盒分别检测小鼠肝匀浆中GSH-Px活性、T-AOC及MDA含量。
结果模型组小鼠肝匀浆中MDA含量升高,GSH-Px活性和T-AOC含量降低,与正常对照组相比,差异均具有统计学意义;与模型组相比,苦参碱能够降低BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中MDA含量,提高GSH-Px活性和T-AOC含量。结论苦参碱的抗炎作用与其提高小鼠体内抗氧化物质的活力有关。
第三部分
苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中炎症介质的影响
目的观察苦参碱对BCG/LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中炎症介质肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1β)、一氧化氮(NO)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)含量的影响。
方法BALB/c雄性小鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组,模型组,联苯双酯组,苦参碱低、中、高剂量组。腹腔注射卡介苗加尾静脉注射脂多糖制备小鼠免疫性肝损伤模型,正常对照组与模型组给予生理盐水,阳性对照组给予150mg/kg联苯双酯,药物处理组分别给予20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg苦参碱。除正常对照组外,其余各组第1天经小鼠腹腔注射卡介苗,第2天起,各给药组以0.1ml/10g灌胃给药,每天1次,连续10天。第12天小鼠尾静脉注射脂多糖进行攻击,禁食12h。摘取小鼠肝脏,制成10%的肝匀浆,用放射免疫方法检测小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β的含量;用NO、iNOS检测试剂盒检测小鼠肝匀浆中NO、iNOS含量。
结果模型组小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β、NO、iNOS含量升高,与正常对照组相比,差异均具有统计学意义;与模型组相比,苦参碱能够降低免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中TNF-α、IL-1β、NO、iNOS含量。
结论苦参碱的抗炎作用可能与下调致炎因子(TNF-α、IL-1β、NO、iNOS),抑制致炎效应有关。
