藜芦生物活性成分和炮制机理研究及益母草化学成分研究

藜芦属（Veratrum Linn．）为百合科（Liliaceae）植物，根及根茎入药，有大毒。治疗中风痰壅、喉痹不通、癲痫、头痛、黄疸、疟疾、疥癣。现代毒理研究表明，藜芦对消化道黏膜、中枢神经系统、延脑迷走神经背核很强的刺激作用。 根据中药炮制学，将藜芦（Veratrum Nigrum L．）根和根茎醋制。利用现代色谱手段从醋制藜芦的总碱部分分离得到11个化合物，非总碱部分分离得到3个化合物，通过化学和光谱学方法鉴定了11个化合物的结构，它们分别是：12β-hydroxylveratroylzygadenine（1）*，1β，3α-dihydroxy -5β-Jervanin-12-en-11-one（2）*,neoverapatuline（3）*，veratramine（4），veratrosine（5），rubijervine（6），gadenine（7），jervine（8），veramarine（9），verdine（10），pseudojervine（11），resveratol（12），piceid（13），β-sitosterol（14）个化合物，其中化合物1，2，3为新化合物。 利用现代色谱手段从黑紫藜芦[Veratrum japonicum（Baker）Loes．f．]的总碱部分分离得到6个化合物，通过化学和光谱学方法鉴定了5个化合物的结构，它们分别是：neogermine（15）*，germine（16），germerine（17），neogermbudine（18），veramitaline（19），其中化合物15为新化合物。 建立了测定藜芦（Veratrum nigrum L．）醋制前后生物碱veratramine（9）含量的测定方法；比较了藜芦（Veratrum nigrum L．）醋制品水提物、米泔制品水提物、生品水提物及生品甲醇超声提取物中生物veratrosine（5）含量；比较了两种藜芦Veratrum nigrum L．和Veratrum japonicum（Daker）Loes．f．醋制前后藜芦醇（12）和虎杖苷（13）的含量差异。建立藜芦（Veratrum nigrum L．）生品甲醇-氯仿混合溶剂超声提取物、醋制品水提物、米泔制品水提物、生品水提物的中10种生物碱成分的含量测定研究。 对所分离鉴定的部分化合物进行了体外细胞毒活性测试，药理模型有：HL-60人白血病癌细胞和SF188人神经胶质肿瘤细胞，结果显示：12β-hydroxylveratroylzygadenine（1），veramarine（9），veratroylzygadenine（7）对HL-60人白血病癌细胞有抑制作用。veratramine（4），rubijervine（6）对SF188人神经胶质肿瘤细胞有抑制作用。 对藜芦（Veratrum nigrum L．）水提物和醋制藜芦（Veratrum nigrum L．）水提物进行急毒评价，试验结果表明藜芦水提物灌胃给小鼠的LD50（bliss法）为4.2g／kg，95％可信限为3.4～5.4g／kg；醋制藜芦水提物灌胃给小鼠的LD50（bliss法）为3.2g／kg，95％可信限为2.5～3.9g／kg。 考察了黑紫藜芦[Vertrum japonicum（Baker）Loes．f．]水提物对小鼠自主活动的影响。结果表明黑紫藜芦[Vertrum japonicum（Baker）Loes．f．]在0.5-1.40g／kg范围内均具有中枢抑制作用，ED50=0.684g／kg。 利用单细胞凝胶电泳方法考察了黑紫藜芦[Veratrum japonicum（Bsker）Loes．f．]水提物，总碱，neogermine（15），germine（16），germerine（17），neogermbudine（18）对小鼠小脑和皮层细胞DNA的影响。 益母草（Leonurus heterophyllus Sweet）为唇形科益母草属植物一年或二年生草本，广泛分布于欧亚大陆温带。其味辛、微苦，具有活血调瘀、利尿消肿之功效。在临床上用于月经不调，产后瘀阻、心脑血管疾病、血液病等疾病的治疗。 从益母草（Leonurus heterophyllus Sweet）地上部分的水提取物和醇提取物中，经溶剂分步萃取，大孔树脂，反复硅胶柱色谱，HPLC，PTLC，sephadex LH-20等方法得到14个化合物，通过理化常数测定和光谱数据分析等手段鉴定为：槲皮素-3-O-[3-（4-羟基-3，5-二甲氧基苯甲酰氧基）-α-L-吡喃鼠李糖基]（1→6）-O-β-D-吡喃半乳糖苷（heteronoside，20）*，芹菜素（apigenin，21），槲皮素（quercetin，22），山柰酚-3-O-β-D-[6-（4-羟基桂皮酰氧基）]吡喃葡萄糖苷（tiliroside，23），芦丁（24），槲皮素-3-O-β-D-（6-O-α-L-吡喃鼠李糖基）吡喃半乳糖苷（quercetin 3-O-robinobioside，25），megstigmane（26），益母草碱（27），ajugoside（28），2，6-二甲基-2E，7-辛二烯-1，6-二醇（29），丁香酸（30），苯甲酸（31），β-谷甾醇（32），胡萝卜苷（33）。其中化合物20为新化合物，化合物25，26，29，30，31为首次从该属植物中分得。