目的：
本实验通过研究当归补血汤对缺氧血管内皮细胞及与肿瘤共培养血管内皮细胞增殖的双向调节作用及其可能机制,揭示当归补血汤双向调节不同疾病血管生成的可能机制,为中医药双向调节理论的探究提供思路和方法。
方法：
建立缺氧血管内皮细胞(EA.hy926)模型(以下简称缺氧模型)及与肿瘤(A549)共培养血管内皮细胞(EA.hy926)模型(以下简称共培养模型),在不同剂量当归补血汤的干预下,通过CCK-8法观察缺氧血管内皮细胞及与肿瘤共培养血管内皮细胞的增殖作用：通过ELISA(?)法检测缺氧血管内皮细胞及与肿瘤共培养血管内皮细胞VEGF及其受体((?)GFR1、VEGFR2、sVEGFR1、sVEGFR2)的表达。
结果：
1.当归补血汤双向调节血管内皮细胞增殖作用
1.1与正常组比较,缺氧血管内皮细胞增殖能力显著下降(P<0.01)；当归补血汤能够促进正常血管内皮细胞及缺氧血管内皮细胞的增殖,其中高剂量和中剂量组促进缺氧血管内皮细胞增殖的幅度明显大于促正常血管内皮细胞增殖的幅度(P<0.01)。
1.2与正常组比较,与肿瘤共培养血管内皮细胞增殖能力显著增加(P<0.01)；当归补血汤能够促进正常血管内皮细胞增殖,与正常组比较,高、中、低剂量组均有差异性(P<0.01：P<0.01：P<0.05)；抑制与肿瘤共培养血管内皮细胞增殖,且与剂量呈正相关,与共培养模型组比较,各剂量组均有显著差异(P<0.01)。
2.当归补血汤调控血管内皮细胞VEGF及其受体(VEGFR1、VEGFR2、sVEGFR1、sVEGFR2)的表达
2.1在VEGF的表达上,当归补血汤各剂量组均能促进缺氧血管内皮细胞和与肿瘤共培养血管内皮细胞VEGF的表达,与缺氧模型组比较,当归补血汤高剂量组有差异性(P<0.05)；与共培养模型组比较,当归补血汤高、中剂量组有显著性差异(P<0.01)。
2.2在VEGFR的表达上,与正常组比较,缺氧模型组在VEGFR1、VEGFR2表达上略为增加(P>0.05),当归补血汤各剂量组均能促进缺氧模型VEGFR1、 VEGFR2的表达,且与剂量呈正相关；共培养模型组VEGFR1、VEGFR2表达显著增加,当归补血汤各剂量组均能抑制共培养模型VEGFR1、VEGFR2的表达,且与剂量呈正相关。
2.3在sVEGFR的表达上,与正常组比较,缺氧模型组sVEGFR1、sVEGFR2的表达显著升高(P<0.01),共培养模型组sVEGFR1、sVEGFR2表达显著下降(P<0.01)；而当归补血汤各剂量组均能抑制缺氧模型sVEGFR1、sVEGFR2的表达；促进共培养模型sVEGFR1、sVEGFR2(?)勺表达。
结论：
当归补血汤能够双向调节不同状态血管内皮细胞的增殖,其机制可能与调节VEGF与VEGFR、sVEGFR两种不同受体的结合有关。
1、当归补血汤能够促进缺氧血管内皮细胞的增殖,抑制与肿瘤共培养血管内皮细胞的增殖,对不同状态血管内皮细胞增殖呈现双向调节作用。
2、当归补血汤虽能促进不同状态血管内皮细胞VEGF的表达,但可选择性调控不同状态血管内皮细胞VEGF受体(VEGFR/sVEGFR)的表达。因此,当归补血汤双向调节血管内皮细胞增殖的机制可能与其促进血管内皮细胞分泌VEGF无关,而与其选择性调控VEGF与其不同受体的结合有关。
