大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷存在于大黄、何首乌、虎杖等中药中，近年的研究表明其对脑中真性乙酰胆碱酯酶活力具有可逆性的抑制作用，可提高中枢的乙酰胆碱含量，而且，对海马神经元损伤具有一定的保护作用，因此，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷既是一种真性乙酰胆碱酯酶可逆性抑制剂，又是海马神经元损伤保护剂，对老年性痴呆等疾病的发生和发展的多个环节有改善作用。大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷显著改善由东莨菪碱导致的小鼠学习记忆功能障碍，并显著提高正常小鼠学习记忆获得能力，与阳性药物石杉碱甲比较，两者无显著性差异。因此，利用大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷来防治老年性痴呆症或提高智力有良好的开发前景。
自然界含有大黄素的中药材（虎杖、何首乌、大黄、决明子等）中多含有一定量的大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，但含量较低。目前，生物转化已成为天然产物结构修饰和改造的有利工具，它是利用生物代谢过程中产生的酶对外源性物质进行结构修饰和改造的化学反应。具有选择性高、条件温和、无污染、成本低、副产物少等优点。因此，本课题欲通过生物技术制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，研制开发防治老年性痴呆的药物，对已逐渐进入老年化的当今社会具有不可低估的意义。
本论文分为四部分。
第一部分文献研究
一、对何首乌、虎杖中的化学成分及药理作用进行综述；二、对生物转化及生物酶法提取在中药中的应用及进展进行综述。
第二部分大黄素-8-D-β-D-葡萄糖苷制备方法的研究
第一章经典方法制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷
采用溶剂回流提取—柱色谱分离法分别从中药何首乌和虎杖中分离得到大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷，大黄素及白藜芦醇苷。
第二章生物法制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷
一、植物培养物对大黄素的生物转化制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷
首次采用植物培养物对大黄素进行生物转化，并以转化率为指标筛选出最佳的转化条件。
首次建立长春花悬浮细胞培养体系中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷含量测定的方法：色谱柱：DiamonsilTM（钻石）C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-水-甲酸（70：29.6：0.4）V／V；流速：1mL·min-1；检测波长：280nm；柱温：室温。回归方程：Y=3E+06X-54.143，相关系数r=0.9998，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的线性范围：0.015μg～0.075μg。
二、生物酶法从中药材中提取结合蒽醌的最佳工艺筛选
首次采用正交实验法优化筛选用纤维素酶法从大黄中提取结合蒽醌的最佳工艺。以结合蒽醌平均含量（％）和干膏率的平均值为两指标，采用加权法来综合评价，结合蒽醌平均含量（％）的得分（X）的权为60％，干膏率平均值的得分（Y）的权为40％，综合评分为Z=60％X+40％Y，最佳工艺40℃，酶解1h，pH=7。
三、微生物酶转化法外源物质6-乙酰大黄素制备实验条件筛选
6-乙酰大黄素是微生物酶转化制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的外源物质。本实验采用单因素法、以IR光谱测定结果及TLC结果为参考，筛选出制备6-乙酰大黄素的最佳条件：取精制大黄素置三角瓶中，50℃干燥1h，以大黄素-试剂（1：3）加入醋酐，于沸水浴回流，迅速加入冷水，振摇，冰箱放置，抽滤，水洗，50℃干燥，即得。
第三部分何首乌药材中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定
首次建立何首乌药材中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定的方法：色谱柱：DiamonsilTM（钻石）C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-水-甲酸（70：29.6：0.4）V／V；流速：1mL·min-1；检测波长：280nm；柱温：室温。回归方程：Y=3E+06X+2187.5，相关系数为r=0.9999，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷线性范围在0.060μg～0.300μg。含量测定结果表明，该方法操作简便，结果准确，具有良好的重复性，回收率合格，可用于测定何首乌中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量，测定结果为0.086％。
第四部分总结与讨论
