葡萄试管苗离体生根机理的研究

针对葡萄脱毒和离体快繁中部分品种生根困难的问题，研究了培养基成分，pH值，培养微环境的光照强度、光质、培养温度对葡萄试管苗生根的影响，不同生根能力葡萄试管苗在增殖期间内源激素含量的变化，内部金属元素含量的变化，内源物质的差异及特殊物质邻苯二甲酸二辛酯(DCP)的生物学效应，取得如下结果： 1．试验用2个易生根葡萄品种和2个难生根葡萄品种试管苗的根系发生时间在蔗糖浓度5g／L—25g／L范围内，随蔗糖浓度增加而延迟，当浓度达到20g/L时，发生最为缓慢，蔗糖浓度增加至25g/L时，根原基发生时间又开始提前。蔗糖浓度在5.0g/L-20.0g/L范围内，生根数随其浓度的增加而增多，以后随浓度的增大而下降，各品种各处理之间的情况各不相同。试管苗的平均根长和根冠比在各处理间的差异均达极显著水平，当蔗糖浓度为15g／L时达最大值，浓度再增大或减小，平均根长和根冠比都减小，说明蔗糖对根的生长影响较大，蔗糖浓度为15g／L-20g／L对葡萄试管苗的生根最有利。 2．不同pH值对试管苗平均根系数量、根粗、根长和根冠比均有明显影响，每株的平均生根数与根长随pH值(5.0-7.0)升高而减小，平均根粗与根冠比随pH值的增大而增大，且4种葡萄试管苗的上述4项指标中，各处理之间均在0.01水平上差异显著。 3．琼脂浓度在3.0g/L-7.0g/L之间，4种葡萄试管苗根系的平均根原基发生时间随着琼脂浓度的增加而逐渐延迟，平均根长与根原基发生具有同样的变化趋势，而平均根粗随琼脂浓度的增加而增大，且该3项指标各处理之间的差异均达极显著水平。矢芙罗莎、森田尼无核和皇家秋天的平均生根数随琼脂浓度的增加而增大，在浓度为6.0g/L达最大值，而后开始下降，而藤稔的平均根粗随琼脂浓度增加而增大，浓度达7.0g/L时达最大值，各处理之间的差异达极显著水平。 4．4种葡萄品种试管苗在4种不同温度(20℃、25℃、30℃和35℃)条件下的根系生长情况不同，生根数在20℃、25℃、30℃ 3种温度条件下无差异或差异不显著，而在35℃时发根数明显受到抑制，与其它处理均在0．01水平差异显著。平均根粗随温度的升高略有下降，但变化不明显；平均根长在30℃为最佳；平均根冠比均在35℃时最大，且35℃时根冠比与其它3种温度条件下的值达0.01水平差异显著，而前3种温度差异不显 著。由此可得出，葡萄试管苗培养的适宜温度28士2℃。 5.4种葡萄品种试管苗在300Olx、Z0001x和SOOlx3种不同光照强度下，每处理 的平均生根数、根长、根冠比和根粗均随光照强度的增强而增大，这与植物组织培养中通 常采用2O001x一30001x的光照强度的做法是一致的。 6.4种葡萄试管苗接种后在白光、红光、黄光、绿光、蓝光和黑暗6种光照条件下 培养，第1一5d均无根的产生，易生根品种矢芙罗莎和森田尼无核的根原基发生和生根时 间由早到晚依次是黑暗一白光一红光一黄光一绿光一蓝光，在白光、黑暗、红光和黄光下 的生根时间主要在第6一10d，而短波光(绿光和蓝光)下处理5d后在白光下生长的试管苗生 根数最多，当处理时间超过5d时，生根明显受到抑制;而难生根品种藤稳和皇家秋天根 原基发生和生根时间由早到晚的顺序是:红光一黄光一黑暗一白光一绿光一蓝光，不论单 色光处理时间的长短，在第6d以后均有根的产生。 7.矢芙罗莎和森田尼无核在4种单色光和黑暗中随处理时间的延长根长逐渐变短，根 鲜重逐渐降低;而生根能力差的藤稳和皇家秋天的根长与根鲜重在黑暗、红光和黄光条件 下处理10d时根长达最大值，而后随处理时间的延长而变短，在绿光和蓝光下均随处理时 间延长而变短。 8.长波光(红光和黄光)促进生根，短波光(绿光和蓝光)抑制生根，这对难生根的 葡萄品种试管苗可先采用长波光短期处理，而后在白光下培养，以达到提高生根率的效果。 9.Cu、Zn、Fe和Ca4种元素含量在4种葡萄试管苗根原基发生时达到最高，而后又 开始下降，生长1个周期(3Od)后，上述4种元素的含量又基本恢复到接种时的水平。 由此说明，Cu、Zn、Fe和Ca4.种元素与葡萄试管苗的生根具有显著的正相关，因而在试 管苗的生根阶段，特别是难生根试管苗的生根阶段，采用两步法生根或适当提高培养基中 的上述4种元素的含量可以提高生根率。Mg元素从接种后开始，含量持续下降，在4种 试管苗的的生根完成后又开始持续上升，这说明Mg元素与试管苗的生根没有显著的相关 性，而与试管苗后期的生长相关。 10.2个生根能力强的品种矢芙罗莎和森田尼无核内源酷类仅有磷酸三(2一乙基己基) 酷、令仔苯二甲酸二丁醋、邻苯二甲酸二异丁酷和4，8，12，16一四甲一4一十七酸内醋4种醋 类。而生根能力较差的藤稳内源醋类有磷酸三(2一乙基己基硒旨、邻苯二甲酸二丁酷、邻苯 二甲酸二异丁酷、4，8，12，16一四甲一4一十七酸内醋、邻苯二甲酸二辛酷(D CP)、邻苯二甲 酸二(2一乙基己基酒旨(B ehP)、十六烷酸异丙酷和2一甲基一丙酸一3，7一二甲基一2一辛酷8种，生 根能力最差的皇家秋天内源酷类有磷酸三(2一乙基己基硒旨、邻苯二甲酸二丁酷、邻苯二甲 酸二异丁醋、4，8，12，16一四甲一4一十七酸内醋、邻苯二甲酸二辛酷口CP)、邻苯二甲酸二 (2一乙基己基)酉旨(B e