人参锈腐菌颉颃放线菌发酵条件及抗生素分离提取

本文主要针对人参锈病菌，对本实验室现有的七个放线菌株进行筛选，选出一株抑菌效果较好的菌株1A，然后从抑菌活性测定、发酵条件优化、活性组分提取、粗品理化性质及活性成分官能团的分析进行了研究，结果如下： 通过平板对峙培养法和抑菌圈法，对7个放线菌菌株进行了初筛和复筛，结果表明有6个菌株对人参锈腐菌具有颉颃作用，其中菌株1A的抑菌活性最好。菌株1A的发酵液对人参锈腐菌（Cylindrocarpon destructans）、禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）、稻瘟病菌（Pyricularia grisea）、玉米弯孢菌（Curvularia lunata）、玉米大斑病菌（Exerohilum turcicum）、烟草赤星病菌（Alternaria alternata）、黄瓜黑星病菌（Cladosporium cucumermum）、蕃茄炭疽病菌（Colletotrichum coccldes）、禾草离蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana）均有较好的抑制作用。 比较了7种发酵培养基对菌株1A产素的影响，初步确定适合的培养基G；对菌株1A发酵条件的进行了研究，结果表明玉米粉和葡萄糖、大豆粉和酵母粉复合使用是菌株lA发酵的最佳碳源和氮源；加入无机盐，可以促进菌株1A产素。通过正交试验明确了最优的发酵培养基配方为玉米粉3（％），葡萄糖1（％），大豆粉2（％），酵母粉0．3（％），KH2PO40．1（％），CaCO30．3（％），NaCl 0．1（％），最佳培养条件为种龄28h、接种量6％、装液量为30mL／250mL三角瓶，发酵周期60h、摇床转速200rpm、发酵温度28℃、pH 7。 对菌株1A发酵液的预处理方法--酸处理法和有机溶剂处理法进行了比较，结果表明，有机溶剂处理法不仅沉淀较为完全，而且有效成分的活性丧失比率小，因此将有机溶剂沉淀法做为本试验的预处理方法。采用溶媒萃取法，收集其有机相，通过减压浓缩，除去有机溶剂，得到黄色的粗品（暂定名为TS08）。比较粗品氯仿饱和溶液与原发酵液抑菌活性，结果表明，粗品活性受外界条件影响较小。 TS08对紫外、高温、低温都具有很好的稳定性，层析试验结果表明TS08中的活性成分为中性物质，水溶性强，并且极性较大。利用显色反应判断该活性成分中可能含有不饱和键。采用特征性官能团反证法，研究结果表明该活性成分不是氨基酸、多肽或蛋白质，可能是糖或糖苷。