葛花活性成分的研究

葛花为豆科植物野葛(Pueraria lobata(Willd)Ohwi)或甘葛藤(P.thomsoii Beeth)的花。近年来,对葛花的开发研究多集中在药理作用方面,但对化学成分的研究很少。本课题旨在对葛花中异黄酮类成分进行研究,开发葛花的药用价值,对葛花的药理作用做进一步研究,为更好的开发利用这一自然资源打下基础。 本课题采用溶剂提取法,再对萃取所得到的乙酸乙酯部分,正丁醇部分分别进行硅胶等柱层析,结合重结晶处理,分离纯化得到5个化合物,经光谱、电子波谱分析和化学分析方法,结合文献报道,鉴定了其中4个化合物,分别为Ⅰ4',7-二羟基-6-甲氧基异黄酮,Ⅱ4' ,5,7-三羟基-6-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,Ⅲ4' ,5,7-三羟基-6-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-吡喃木糖-(1→6)-β-D -吡喃葡萄糖苷,Ⅳ葛根素。 采用超声波辅助萃取的方法,分别对溶剂浓度、溶剂用量、超声时间、温度进行了考察,得出葛花总黄酮最佳提取工艺是乙醇浓度为70%,料液比为1:20,温度为80℃,提取时间为80min,总黄酮收率为5.19%。研究不同型号大孔树脂纯化葛花总黄酮的工艺条件及参数,以静态饱和吸附量、洗脱量、静态洗脱率为考察指标,比较了5种大孔树脂,以总黄酮的转移率和含量为指标对大孔树脂吸附工艺条件进行了筛选,结果5种大孔吸附树脂中,AB-8树脂具有最佳的吸附及洗脱参数,其最佳工艺为:上样液浓度为2.84 mg·mL-1,上样液pH值为4.0,用70%乙醇以3 mL·min-1速度洗脱。总黄酮转移率大于81%,其含量大于58%。 分别采用羟基自由基试剂盒、超氧阴离子自由基试剂盒、1,1-二苯基苦基苯肼自由基试剂盒、总抗氧化活性试剂盒,对葛花提取物中葛花总黄酮中羟基自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基苦基苯肼自由基消除能力的测定以及提取物总的抗氧化能力的测定。测定结果表明,葛花提取物中黄酮类物质具有较强的抗羟基自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基苦基苯肼自由基的能力以及具有较强的总抗氧化能力,且它们的作用与其中的含量具有一定的量效关系。通过对提取物的保肝降酶活性研究,统计结果显示,提取物对小鼠CCl4引起的肝损伤具有显著的保肝降酶的活性。