本研究通过器官发生途径建立和优化辣木组织培养再生体系,对辣木的组培快繁体系的建立和相关机理进行研究,主要结果如下:
1、采用新鲜辣木种子培养试管苗。新鲜去皮辣木种子用1‰升汞消毒处理10min,10d后种子萌发率达77.92%,且获得试管苗健壮。相比之下,贮藏一年的种胚污染率提高1倍,发芽率下降了近8倍,且种胚萌发获得的试管苗细弱。嫩枝用1‰升汞消毒10min的效果较好,但萌发率很低,仅为11.07%。
2、采用嫩枝切片为外植体诱导愈伤组织,获得三种可持续继代愈伤组织类型。Ⅰ型愈伤组织有瘤状突起、表面有黏性物质;Ⅱ型愈伤组织白色、质地紧密;Ⅲ型愈伤组织黄色、颗粒状。Ⅰ型愈伤组织增殖的最佳配方MS+2mg/L2,4-D+1mg/L KT,Ⅱ型愈伤组织增殖最佳配方为MS+1mg/L2,4-D+0.5mg/L KT,Ⅲ型愈伤组织增殖最佳配方为MS+0.5mg/L2,4-D。愈伤组织形态与生长周期及生理生化相关,Ⅲ处于增殖期的愈伤组织细胞活性强,适宜作为分化材料。
3、采用辣木试管苗下胚轴为外植体,通过器官直接发生途径建立辣木快繁体系。辣木下胚轴最佳芽诱导培养基配方MS+2.0mg/L6-BA,不定芽丛芽明显。辣木下胚轴不定芽增殖采用0.5-0.8mg/L6-BA与0.2-0.3mg/L NAA,增殖率可达到7倍以上。
4、采用嫩枝腋芽为外植体,通过器官直接发生途径建立辣木快繁体系。辣木腋芽为外植体诱导芽时不宜添加外源激素,MS基本培养基为辣木腋芽诱导芽的最佳培养基。芽增殖宜采用0.8mg/L6-BA+0.2mg/L NAA,增殖率达4.3。
5、MS+0.5mg/L IAA出根率为78.06%,而且根系、苗木生长情况良好,为最佳诱根培养基配方。炼苗驯化过程的结果发现,珍珠岩和营养土混合的基质经过灭菌处理后透气性好,保湿效果好,满足辣木对水的需求同时也不会烂根,移栽苗成活率达22.50%。