光皮木瓜[ Chaenomeles Sinensis ( Thouin) Koehne ]为蔷薇科木瓜属植物,我国木瓜资源丰富,种植面积大。光皮木瓜果实营养丰富,含有丰富的有机酸、氨基酸、多糖、黄酮、三萜及其苷类等化合物,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等功效,是集食用、药用和观赏于一体的多用途植物,中国药典2005年版(一部)记载木瓜“夏、秋二季果实绿黄时采摘”,主要加工产品有木瓜果酒、果脯等。为充分开发利用木瓜资源,对光皮木瓜果实发育期间主要成分含量的变化规律进行了分析,并对光皮木瓜多糖提取分离技术条件及体外抗氧化活性进行了研究,以采收高品质木瓜,充分发挥其保健价值。研究主要结果如下:
1.光皮木瓜果实发育期间,可溶性固形物含量总体呈上升趋势,花后151d达到最大值14.8%;干物质、粗纤维和多酚含量的变化均呈单峰型,分别于花后95d、67d和95d达到峰值(26.49%、14.96%、84.84 mg/g DW);黄酮、多糖、齐墩果酸含量均呈逐渐增加趋势,其中多糖和齐墩果酸均于花后137d达到最大值,分别为110.43 mg/g DW和10.31 mg/g DW,黄酮含量在花后151d达到最大值3.21mg/g DW。多酚的单果产量在果实发育过程中呈先增后减的趋势,花后95d多酚单果产量达到最高(5.4486g);齐墩果酸、多糖及黄酮的单果产量在果实发育期间逐渐增加,花后165d多糖的单果产量达到最高值(8.5081g),花后179d黄酮和齐墩果酸的单果产量均达到最高值(0.2612g和0.7474g)。研究表明,花后137d至151d木瓜果实青绿,齐墩果酸、多糖、黄酮含量最高,为加工木瓜饮片等的最佳采收期;以齐墩果酸、多糖、黄酮的提取生产为目的应选择花后165d至179d采收;加工果酒、果脯、果醋等木瓜食品应选择花后179d采收。
2.采用热水浸提和超声波法提取光皮木瓜多糖。结果表明:热水浸提光皮木瓜多糖的最佳提取条件为料液比1∶5 0、提取温度90℃、提取时间180min,在此条件下光皮木瓜多糖提取率为11.784%。超声波法提取光皮木瓜多糖最佳提取条件为料液比1:45、提取温度80℃、提取时间40min,超声波功率600W,在此条件下光皮木瓜多糖提取率为12.072%。
3.比较了Sevag法、木瓜蛋白酶-Sevag法、三氯乙酸法脱蛋白的效果,结果表明:在光皮木瓜粗多糖溶液中加入木瓜蛋白酶,使其质量浓度为0.1g/100mL,在60℃下酶解3h,再采用Sevag法连续作用3次可将大部分蛋白质去除,蛋白质脱除率为91.312%,多糖保留率为81.341%。木瓜粗多糖溶液加入4g/100ml XDA-7树脂于25℃下180r/min摇床中脱色240min,脱色率为69.171%,多糖损失率为15.515%。
4.脱蛋白、脱色、透析除去无机离子和小分子杂质后得到的光皮木瓜多糖,经DEAE-52纤维素柱层析分离,用0.1mol/L NaCl、0.2mol/L NaCl和0.3mol/L NaCl洗脱后得到3个多糖组分。经纸层析、Sephadex G-200凝胶柱层析,均为均一性多糖。紫外光谱结果表明,3个多糖组分均不含蛋白质和核酸等杂质。
5.光皮木瓜多糖对NO2-、DPPH以及·OH清除作用明显,具有较好的还原力,表明光皮木瓜多糖有较好的抗氧化活性。