免疫增强剂的筛选和相关机制研究

本文利用小鼠脾淋巴细胞增殖模型和小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α生成模型从26个人参皂苷单体及56个MDP-Taxol共轭物中筛选得到两个免疫增强剂：人参皂苷-F3和MTC-O1。人参为中国传统补虚要药，具有扶正固本，大补元气之功效。按现代药理学理论解释传统的补虚，其实质为增强各脏器的功能，提高整个机体的免疫能力及对环境的适应能力。人参对免疫功能的影响尤为突出。人参的主要有效成分为人参皂苷。本文筛选得到人参皂苷-F3能够显著的促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。进一步的作用机理研究表明在0．1～100μmol／L的浓度范围内人参皂苷-F3显著的促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖；促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞产生1型细胞因子：白介素-2，干扰素-γ；而降低ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞产生2型细胞因子：白介素-4，白介素-10；加强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞内干扰素-γ和T-bet的mRNA表达而降低白介素-4和GATA-3的表达；其作用均在10 μmol／L最强。在10 μmol／L时人参皂苷-F3能够增强小鼠脾淋巴细胞内ConA诱导的NF-κB DNA结合活性。因此，人参皂苷-F3通过调节脾细胞内NF-κB DNA结合活性及1型和2型细胞因子的转录和表达发挥免疫增强作用。 早期研究表明，紫杉醇被用做治疗肿瘤药物不仅是因为其结合到微管蛋白上，而且作为脂多糖(LPS)的模拟物，它也能够通过影响和改变免疫系统内巨噬细胞的亚型和功能来达到治疗肿瘤的目的，但由于其在临床使用上剂量限制性毒性、多药耐药性以及骨髓抑制副作用等使其的应用受到了一定的限制。非特异性的巨噬细胞免疫调节剂胞壁酰二肽衍生物可以协同脂多糖大大提高激活巨噬细胞表达细胞因子的能力，但与提高磷脂多糖的毒性无关。这一实验结果使我们有理由推论，胞壁酰二肽有可能会协同紫杉醇提高激活巨噬细胞的能力从而提高机体的免疫功能。本论文筛选得到的MTC-O1能够显著促进小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的产生。进一步采用ELISA的方法检测了MTC-O1对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α，IL-12的影响；RT-PCR的方法检测MTC-O1对小鼠腹