《中国药典》收录的药材中吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物的分析检测研究

本论文以药典收载药材为研究对象,分析检测其中吡咯里西啶类生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)及其氮氧化物的含量与种类。其研究结果不仅能够了解传统药材中PAs的分布现状,有助于相关限量标准的制定,同时也可以为中药材的安全使用与风险评估提供量化参考。本研究希望建立一种适合中药材中吡咯里西啶生物碱的分析检测方法,并应用该方法完成不同来源的传统药材中吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物的定性与定量分析。从而得到药典收录药材中PAs含量与种类的初步结果,为中药材中该类毒性成分的进一步研究提供实验基础。实验过程中,选取超高效液相色谱-串联四级杆质谱的检测技术,运用固相萃取的纯化方法,优化建立了中药材中吡咯里西啶类成分的分析检测方法。该方法灵敏度高,可用于该类成分在中草药中的痕量测定。实验采用32个不同类型的PAs对照品,收集不同来源的2015版《中国药典》收录的传统药材为试验对象,对其中批咯里西啶生物碱及其氮氧化物的种类与含量进行测定。同时收集不同来源的药材,将其应用于不同批次的款冬花、紫草、大蓟和半枝莲样品中PAs的检测,以进一步探讨不同来源的药材中PAs的含量与分布差异。本研究中与其他两个课题组共收集检测了 386种药典药材,检测到其中271种含有PAs(含量≥0.1 μg/kg)。根据药典用量估算出药材的大致日摄入量,其中日最高摄入量超过欧盟限定标准0.4248μg/day(按成人体重60 kg计算)的药材共有18种。本课题组收集不同来源的款冬花、紫草、大蓟、半枝莲药材,进行PAs含量测定。检测结果发现:款冬花中PAs的平均总检出量约为47.25 mg/kg,所含该类生物碱的种类基本相同,但各成分的含量具有一定差异。其中最主要的成分为克氏千里光碱(Senkirkine),具有显著的肝脏毒性。不同来源的紫草、大蓟、半枝莲药材中PAs平均总检出量差异显著,所测得成分的种类分布略有不同。紫草中PAs的平均总检出量约为33.28 mg/kg,以Echimidine-iV-oxide为主要的PAs成分,其余成分均为开环类不饱和型,毒性相对较弱。大蓟、半枝莲中PAs检出量相对较低,平均总检出量约为0.0956 mg/kg与0.0321 mg/kg,本论文中首次完成了对该两种药材中PAs类成分的含量测定。本研究的检测方法具有高效、快捷、灵敏度高等优点,适合用于中药材中吡咯里西啶类成分的分析检测。对药典中不同来源的药材混合样品的检测结果表明:大部分药典收载的药材中检测出PAs类成分。其中,检出量较高的药材包括一些常用的品种,但目前并未见有相关安全使用的标准。此现状应当引起有关部门的重视,开展更广泛的调查与研究,以保证传统常用中药材的用药安全。对款冬花、紫草、大蓟、半枝莲的多批次样品检测结果表明:不同来源的药材中所含PAs类成分的种类与含量具有一定差异,不同种类的PAs化合物在药材中的分布也有不同。因此,针对不同来源药材中PAs类成分的考察,可确保结果的准确性与标准制定的合理性。