四君子汤对胃癌侧群细胞增殖及凋亡的影响

目的：从胃癌侧群（Sidepopulation,SP）细胞角度研究四君子汤对胃癌细胞增殖、凋亡的影响，为课题组下一步研究四君子汤作用于胃癌侧群细胞的机制研究打下基础。 方法：1.体外培养人胃癌细胞株高分化胃癌细胞株MGC-803、中分化胃癌细胞株SGC-7901及低分化胃癌细胞株BGC-823；2.应用流式细胞仪检测并分选三株胃癌细胞的侧群细胞；3.四君子汤血清的制备；4.应用CCK-8法检测四君子汤药物血清干预前及干预后SP细胞与非侧群（Non-sidepopulation,NSP）细胞及未分选细胞的增殖能力；5.应用流式细胞仪检测药物血清干预后SP细胞周期及细胞凋亡的变化；6.应用Westernblot法检测药物血清干预后SP细胞中凋亡蛋白BAX及Bcl-2表达的变化。 结果：1.SGC-7901SP比例为2.57±1.56%、BGC-823SP细胞比例为2.62±1.03%、MGC-803进行了6个样本的检测均未检测到SP细胞。 2.SP细胞的7天增殖倍数（SGC-7901：20.90±0.66；BGC-823：29.50±0.64）明显高于NSP细胞及未分选细胞(P<0.01)。 3.随着药物血清浓度的升高，SP细胞的增殖抑制率逐渐升高：SGC-7901SP细胞的增殖抑制度为低剂量：45.87±0.10%、中剂量：64.36±1.18%、高剂量：73.58±2.48%；BGC-823SP细胞的增殖抑制度为低剂量：41.45±0.11%、中剂量：57.80±3.24%、高剂量：69.85±0.81%与NSP细胞无差异（P>0.05）。 4.随着药物血清浓度的升高及作用时间的延长，两株胃癌SP细胞细胞周期的G2期及S期逐渐降低，细胞被阻滞于G1期。 5.随着药物血清浓度的升高及作用时间的延长,SP细胞的凋亡率逐渐升高：SGC-7901SP细胞凋亡率在高剂量48小时组达到28.20±2.19%；BGC-823SP细胞凋亡率在高剂量48小时组达到19.51±2.35%均明显高于生理盐水对照组（P<0.05）,且与NSP细胞之间无明显差异（P>0.05）。 6.随着药物血清浓度升高及作用时间延长，SP细胞的促凋亡蛋白BAX的表达逐渐升高，抑凋亡蛋白Bcl-2的表达逐渐降低：SGC-7901SP细胞BAX蛋白表达在高剂量48小时组升至0.862±0.075；BGC-823SP细胞BAX蛋白表达在高剂量48小时组升至0.733±0.021均明显高于生理盐水对照组（P<0.05），且与NSP细胞之间无明显差异（P>0.05）。SGC-7901SP细胞Bcl-2蛋白表达在高剂量48小时组降至0.297±0.035；BGC-823细胞Bcl-2蛋白表达在高剂量48小时组降至0.240±0.039均明显低于生理盐水对照组（P<0.05），且与NSP细胞之间无明显差异（P>0.05）。 结论：1.胃癌细胞中存在SP细胞;SP细胞的增殖速度明显快于NSP细胞及未分选的胃癌细胞。 2.四君子汤药物血清可以抑制胃癌SP细胞增殖、促进胃癌SP细胞凋亡，促进促凋亡蛋白BAX表达，抑制抑凋亡蛋白Bcl-2表达。 3.四君子汤对SP促凋亡作用与NSP细胞无明显差异。