道地药材形成的实质源于产地,解决药材的产地溯源问题是确定药材地道性的关键。目前中药材产地判别的方法有形态、理化鉴别及指纹图谱,无机元素分析,但其适用性有限,说服力不足,更无法判断中药制剂中原药材的产地。
近年,应用元素分析法特别是同位素法在酒、咖啡、果汁、牛肉、羊肉等原产地判别上取得了重要进展,方法渐趋成熟。该技术是依据地球化学信息,所以本方法具有普遍适用性。但目前元素分析法在中药材产地溯源上的应用还是空白。中药材道地性的表征就是产地,因此确定中药材产地也是研究中药材道地性的关键之一。西洋参非本国原有药材,其来源于美国威斯康星和加拿大诸省,我国于1975年引种成功。由于西洋参产地明确,产地区别大,因此本研究拟选用西洋参为示例进行产地判别研究。此外国产与进口西洋参价格差异大,市场上以假充真,以次充好时有出现,对西洋参进行产地溯源具有实际意义。
用无机元素与同位素比率分析相结合方式对西洋参原药材及其制剂进行测定,对数据进行变量压缩,筛选有判别意义元素参数,建立产地判别模型并加以验证。本课题通过对产自于中国、加拿大、美国的西洋参及其制剂进行产地建模及判别研究,主要研究内容如下：
第一章世界范围内西洋参种质资源调查采样
1对西洋参主产地气候、经纬度、海拔进行了调研。通过对西洋参主产地地理环境、日照时间及降雨量的对比,得出西洋参各产地差异较大的结论。
2对西洋参主产地山东(文登、荣成)、北京(怀柔)、吉林(黄泥河、抚松、九台)、加拿大(温哥华、安大略省)、美国(威斯康星)进行了样品采集。共采集西洋参原药材样品共50份,其中山东文登6份、山东荣成3份、北京怀柔11份、吉林黄泥河2份、吉林九台4份、吉林抚顺5份、加拿大温哥华4份、加拿大安大略6份、美国威斯康星洲9份。
第二章西洋参无机元素产地判别模型的建立
1微波消解条件的优化
通过对消解时间、消解体系及消解液配比进行了考察,最后确定HNO3与H2O2体积之比为4：1、温度190℃、恒温时间10min样品消解完全。
2不同产地西洋参无机元素含量测定
选取不同产地样本,在60℃烘干,粉碎至100目,90℃干燥,冷却后,装入自封袋。分别精密称量每批次西洋参粉末三份,每份约0.1g,利用电感耦合等离子体质谱测定西洋参中常规无机元素和部分重金属离子,分别是Be、Mg、Al、K、Ca、V、Cr、Mn、 Fe、Co、Zn、Ni, Cu、Ag、Sr、Pb、Sb、Ba、Hg、T1、Pb、Th、Cd、As、Mo、U等32种元素。通过数据分析确定有意义元素为Na、Mg、V、Fe、As,通过判别分析分析法构建并验证产地判别模型。北京产地西洋参判断正确率为83.3%、吉林产地西洋参判断正确率为77.8%,、山东产地西洋参判断正确率为87.5%,加拿大西洋参判断正确率为90.9%。
第三章西洋参同位素产地判别模型的建立
选取不同产地样本,在60℃C烘干,粉碎至100目,90℃C干燥,冷却后,装入自封袋。分别精密称量每批次西洋参粉末三份,每份约0.01g,应用IRMS测定C、H、O、N同位素比率。通过数据分析得出有意义元素为H、O、N,通过判别分析法构建不同目的的产地判别模型。判断正确率分别为北京怀柔72.7%、吉林100%、美国威斯康星100%、加拿大70%、山东55.6%。
第四章西洋参原粉入药制剂西洋参产地判定方法的建立
取上述已测好的的西洋参粉末,按照压片过程,添加辅料,模拟压片,加水溶解,离心,去除上清液,重复三次上面操作,90℃C烘干,玛瑙研钵研碎过100目筛子,装入自封袋精密,称量干燥后的西洋参粉末约0.0lg。应用IRMS测定C、H、O、N同位素比率。处理数据,压片前后同位素比率对比没有差异,可以应用上述同位素判别模型对西洋参含片进行产地判别。
