六味地黄丸治疗帕金森病作用机制的实验研究

目的 观察1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型小鼠异常行为变化。探讨PD的发病机制及运用六味地黄丸治疗PD的作用机理。 方法 选用C57BL小鼠50只,雄性,体重20～25克。以无菌生理盐水溶解MPTP后,按25mg/kg的剂量腹腔注射小鼠,每日1次,连续5天,制备PD模型。将实验动物随机分为5组,即正常对照组(A)、模型组(B)、美多巴组(C)、六味地黄丸组(D)、美多巴加六味地黄丸组(E)(后3组简称给药组)。在造模过程中观察小鼠的异常行为变化。正常对照组与造模成功后的模型组以生理盐水灌胃,美多巴组、六味地黄丸组、美多巴加六味地黄丸组根据药理学方法计算小鼠给药量,按照每次灌胃量0.5ml配制,每日1次,连续4周。观察六味地黄丸对帕金森病模型小鼠异常行为表现的影响,应用免疫组化法测定小鼠黑质酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞数量的变化;测定小鼠中脑黑质部位超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平的变化。 结果 1.行为学方面的改变:以爬竿时间为指标考察小鼠行为学变化,模型组与正常对照组比较有显著性差异(P＜0.01);给药组给药2周及4周后与模型组比较均有显著性差异(P＜0.01);给药组之间比较无明显差异(P＞0.05),给药组给药4周后与正常组比较有差异(P＜0.05)。以滚筒时间为指标考察小鼠行为学变化,经过治疗的3组小鼠行为都有改善,与模型组比较均有显著性差异(P＜0.01)。 2.小鼠脑黑质致密部TH神经元数量测量结果:与正常组比较,模型组脑黑质致密部TH阳性神经元的数量下降(P＜0.01);在给药4周后,给药组黑质致密部TH阳性神经元数量增加,与模型组比较有显著差异(P＜0.01),给药组之间比较无统计学意义;给药4周后给药组与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),其中以E组的疗效最佳。 3.小鼠中脑黑质部位SOD、GSH-Px活性及MDA水平的变化:脑组织GSH-Px、SOD含量与正常组比较,模型组明显降低(P＜0.01),而MDA含量模型组较正常组明显升高(P＜0.01);与模型组比较,给药组小鼠脑内SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平下降(P＜0.01)。 结论 通过给C57BL小鼠腹腔注射MPTP,观察小鼠的异常行为表现,成功制备PD模型。通过实验分组将D组与其它组进行比较,证明六味地黄丸对MPTP诱导的PD模型小鼠黑质多巴胺神经元有保护作用,经六味地黄丸给药可以改善MPTP致帕金森病小鼠的运动功能障碍,提高机体抗氧化能力,减轻机体的氧化应激损伤。