金雀异黄素治疗Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠的实验研究及其机制探讨

目的： 本实验通过给予RA动物模型Ⅱ型胶原诱导型关节炎(collagen type Ⅱ-induced arthritis, CIA)大鼠金雀异黄素(genistein, Gen),甲氨蝶呤(methotrexate, MTX)及两者联合的治疗,观察其对CIA大鼠的治疗作用,以探讨其作用的可能机制。 研究对象： SD大鼠 方法： 首先,将40只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、Gen治疗组、MTX治疗组和Gen+MTX治疗组,每组8只。除空白对照组外,各组大鼠用Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂注射诱导CIA建立大鼠模型。Gen治疗组造模次日开始用药,每天胃内灌注Gen混悬液1ml,剂量为30mg/(kg·d); MTX治疗组造模后开始用药,每周胃内灌注0.2mg/kg; Gen+MTX治疗组两种药物联合应用；空白对照组和模型对照组每天灌注等量的生理盐水。然后,各组大鼠每日进行一次关节炎指数(arthritis index, AI)评分及后肢容积测定,并于造模后第6周,摄取大鼠关节X线片,然后处死大鼠,取膝关节用免疫组织化学法检测其滑膜的微血管密度(microvessles density, MVD),并取血清用Western Blotting法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase, MMP)-1、2、9的表达并计算相对含量。 结果： 1、CIA大鼠模型关节炎指数评分、后肢容积、关节X线片及关节滑膜组织病理情况与正常大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05),提示造模成功。 2、各治疗组大鼠关节炎指数评分、后肢容积、关节X线片及关节滑膜组织病理情况较模型对照组减轻,Gen与MTX治疗组无明显差异,Gen+MTX治疗组的效果更佳。 3、Gen和/或MTX可使CIA大鼠关节滑膜新生血管数目明显减少,同时还能降低血清中表达IL-1β、TNF-α、VEGF和MMP-1、2、9的表达(P<0.05)。 结论： 1、Gen和/或MTX对CIA大鼠有治疗作用,Gen+MTX治疗组的效果更佳。 2、Gen和/或MTX对CIA大鼠的疗效可能是通过下调IL-1β、TNF-α的表达发挥抗炎作用以及通过下调VEGF和MMP-1、2、9的表达发挥抗滑膜血管新生的作用来实现的。