龙眼体细胞胚胎成熟机理的研究

本研究以龙眼“红核子”、“十二月龙眼”等品种胚性愈伤组织诱导出的小子叶形体胚为材料，采用石蜡切片、蛋白质电泳、可溶性糖和淀粉含量测定等手段，研究了光照条件、蔗糖浓度、PEG、ABA、椰乳等因素对龙眼体胚成熟的影响，以探讨龙眼体胚成熟机理。主要研究结果如下： 一、比较了光照、蔗糖浓度、PEG、ABA、椰乳等因素对龙眼体胚成熟的影响。黑暗和高浓度蔗糖(5％)有利于龙眼体胚的成熟，经过75d的“成熟培养”，体胚增大明显，白色，结实；椰乳对龙眼体胚成熟有利；光照、低糖、PEG、ABA均不利于龙眼体胚的成熟。 二、龙眼体胚经历黑暗和高浓度蔗糖(5％)的正常成熟过程，其体胚在细胞形态学上有共性，在体胚成熟过程中可见到明显的子叶和胚芽原基形成，生长点的细胞排列紧密，染色较深，富含淀粉粒；光照、低糖、PEG、ABA条件下成熟的体胚即使在成熟初期阶段能观察到子叶和芽原基，但到成熟后期时子叶断裂，胚芽原基消失，且细胞结构松散，染色较深的细胞较少。 三、龙眼体胚成熟过程和每个成熟阶段都可检测到特异蛋白质。在黑暗低糖和ABA同时作用下，龙眼体胚成熟过程中蛋白质合成最活跃，可检测到的蛋白质组分最多，蛋白质分子量变化范围最大，且大部分都在10～30KD之间；PEG作用下体胚成熟过程中蛋白质合成受阻，可检测到的蛋白质组分最少。 四、在高浓度蔗糖(5％)的作用下，龙眼体胚成熟过程各阶段总糖、果糖、蔗糖含量变化呈双峰型，而没有高糖作用的体胚成熟过程中可溶性糖含量的变化呈单峰型。龙眼体胚经过正常成熟后能够高频率萌发似乎与其可溶性总糖、蔗糖积累有关。 五、在光照低糖、光照高糖、黑暗低糖和PEG的作用下，龙眼体胚成熟过程中淀粉含量变化相似，整个成熟过程中淀粉含量变化呈单峰型；黑暗低糖、黑暗低糖和ABA、黑暗高糖和ABA、黑暗高糖和椰乳的作用下，龙眼体胚成熟过程中淀粉含量变化呈双峰型。而在黑暗和高浓度蔗糖(5％)作用下经历正常成熟的体胚，3个供试材料中淀粉含量变化也很相似，淀粉含量总的趋势都是上升。