目的:观察高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)对成年大鼠认知功能(cognitive function)的影响,探究HUA影响认知功能的具体机制。方法:健康、成年(8周龄)雄性SD大鼠75只,体重200±20 g。随机分为三组:空白对照组,蒸馏水组,高尿酸组,25只/组。采用酵母膏联合乙胺丁醇(尿酸酶抑制剂)灌胃法建立高尿酸血症动物模型,空白组不做任何处理,蒸馏水组灌胃与高尿酸组等量的蒸馏水。每天选取固定时间点进行灌胃操作,每周末选取固定时间点取眼球血测定各组大鼠血尿酸浓度。第7周末,应用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力(逃避潜伏期、跨越原平台次数)(17只/组),然后随机选取大鼠9只/组,分离其海马组织进行匀浆,取上清液测定海马组织中丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),抗超氧阴离子(ASAFR)及过氧化物歧化酶(SOD)活力等氧化应激指标,将剩余大鼠海马组织(8只/组)进行HE染色,光镜下观察海马区神经元细胞形态学结构,TUNEL法(细胞凋亡末端标记法)观察海马区锥形细胞凋亡情况,计数凋亡指数(AI%)。结果:1.高尿酸模型:第三周末高尿酸组大鼠的尿酸水平已经达到285μmol/L,以后一直保持高尿酸水平,表明已经造模成功;2.Morris水迷宫实验:1)随着训练时间的延长,各组大鼠定位航行实验时间缩短;在同一时间段,与空白组和蒸馏水组比较,高尿酸组大鼠寻找平台的平均逃避潜伏期无明显缩短(P>0.05);2)与空白组和蒸馏水组相比,高尿酸组空间探索实验穿越平台次数明显增多,但差异无统计学意义(P>0.05);3.氧化应激指标:与空白组和蒸馏水组相比,高尿酸组大鼠海马组织中MDA含量明显降低(P<0.05);GSH-Px,ASAFR,SOD含量明显增高(P<0.05);4.病理学变化:HE染色后光镜下观察空白组、蒸馏水组及高尿酸组大鼠海马神经元细胞形态、大小基本正常,呈圆形、椭圆形状,排列紧密,锥形细胞数目无明显减少,细胞核淡蓝色染色,着色较均匀,核仁清晰可见,核膜完整。未见细胞水肿,无明显核固缩及核碎裂等病变细胞,三组比较无明显差异。TUNEL细胞凋亡检测法显示,各组大鼠海马区未见明显锥形细胞凋亡,相比空白组和蒸馏水组,高尿酸组凋亡指数(AI%)亦无明显减少(P>0.05)。结论:1.通过酵母膏联合乙胺丁醇灌胃法制作高尿酸血症大鼠模型,操作简单可行,与人体形成高尿酸血症的病理生理过程极为相似,是目前研究高尿酸血症及其相关疾病较为稳定且理想的动物模型;2.5W高尿酸水平未见对实验大鼠学习记忆能力有明显影响;3.罹患5W高尿酸血症能有效减少有害氧化应激自由基的产生,增加自由基清除率,减轻氧化应激反应带来的损伤;4.5W高尿酸水平未见大鼠海马区神经元细胞明显病理学改变。
