黄柏炮制原理及质量标准研究

目的: 黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.的干燥树皮,具有清热燥湿,泻火除蒸,解毒疗疮之效。盐黄柏为主要炮制品,临床上主要用于滋肾阴,泻相火。但是黄柏盐炙工艺参数不完善,本研究旨在优选黄柏盐炙工艺,分析炮制后化学成分变化,比较生制品滋肾阴作用,解析炮制原理,制定黄柏及盐黄柏质量标准。 材料: 黄柏丝、盐酸小檗碱、盐酸小檗红碱、盐酸黄柏碱 方法: 1.黄柏盐炙工艺研究 通过单因素研究,选择炒制温度、炒制时间、加盐量和闷润时间为考察因素,以盐酸小檗碱和盐酸小檗红碱含量为指标,采用正交设计优选出黄柏盐炙工艺。以优选的工艺为基础,结合生产实际条件,炒制三个产地10批黄柏,确定黄柏中试盐炙工艺。 2.黄柏盐炙前后化学成分变化研究 通过薄层色谱和高效液相色谱法,比较黄柏盐炙前后化学成分变化情况。 3.黄柏盐炙前后药理作用 采用甲状腺素法造“甲亢肾阴虚症”大鼠模型,分别灌胃给于大鼠黄柏生品及盐炙品连续三周,测定血清中FT3、FT4含量、尿17--羟皮质类固醇含量、心率、红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性,研究黄柏及其炮制品对神经内分泌系统的影响,比较黄柏炮制前后的滋阴作用情况;以干酵母致大鼠实热模型,观察黄柏生品和盐炙品对大鼠体温升高的抑制作用,比较黄柏生制品清实热的作用情况。 4.黄柏及盐黄柏质量标准研究 以盐酸小檗碱、盐酸小檗红碱和盐酸黄柏碱为指标,研究了黄柏和盐黄柏的质量标准。对十批不同产地黄柏和盐黄柏分别进行杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物等方面的测定,制定了黄柏和盐黄柏质量标准。 结果: 1.确定黄柏盐炙最佳工艺:每100g黄柏加入盐2g,闷润1hr,在150～160℃条件下炒8分钟。以药材量的30%的水溶解盐;中试盐炙工艺:每100kg药材加入2kg盐,以盐水闷润,至药透汤尽后,置炒药机内在150℃-160℃炒制5分钟,用15L水溶解盐,炮炙耗率<4%。 2.黄柏烘制后,盐酸小檗碱部分转化为盐酸小檗红碱,盐酸小檗红碱含量先升高,在180℃60min时其含量最高,达到1.86%,而后降低;黄柏烘制品和盐炙品中盐酸黄柏碱的含量均高于生品。 3.黄柏生品及盐炙品能降低肾阴虚大鼠血清中FT3、FT4含量、心率和血液红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性,盐炙品高剂量能降低大鼠尿17--羟皮质类固醇含量,二者具有滋肾阴作用,其中盐炙品作用强于生品;黄柏生品低剂量能够显著抑制大鼠的体温升高,具有良好的清热泻火作用,而盐炙品作用不明显。 4.盐酸小檗碱、盐酸小檗红碱和盐酸黄柏碱的方法学考察中各项均符合有关规定。按干燥品计算,暂定黄柏中盐酸小檗碱含量不低于3.00%,盐酸黄柏碱含量不低于0.41%;盐黄柏中盐酸小檗碱含量不低于3.00%,盐酸小檗红碱含量不低于0.08%,盐酸黄柏碱含量不低于0.38%。 结论: 1.优选的盐炙黄柏最佳炮制工艺经过中试放大实验,其结果与初试结果基本一致,证明盐炙黄柏的炮制方法稳定可行。 2.黄柏盐炙后,其成分发生了质变和量变,盐酸小檗碱部分转化为盐酸小檗红碱,盐酸黄柏碱的含量增加。这些成分变化为黄柏盐炙原理提供了重要依据。 3.黄柏生品和盐炙品均具有滋肾阴的作用,且盐炙品作用强于生品,证实了黄柏盐制后引药入肾,滋肾阴作用增强的理论。 4.黄柏生品和盐炙品均具有清实热的作用,且生品作用强于盐炙品,表明黄柏盐炙后,缓和了寒性,提示临床用于清实热时以生黄柏为宜。 5.通过对不同产地黄柏及其盐炙品的杂质、水分、总灰分、浸出物和含量等的测定,所制定的黄柏和盐黄柏的质量标准稳定可行,并可用于评价和控制生、制黄柏的质量。