黄芪含药血清对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型细胞活性的影响

目的： 本研究通过拆方观察养心汤方中单味中药黄芪不同浓度含药血清对H2O2诱导HUVEC（人脐静脉内皮细胞）氧化损伤模型细胞增殖的影响及对损伤HUVEC的保护作用，以进一步研究养心汤对冠心病不稳定型心绞痛的确切作用机制，为中药新药的进一步研发提供客观依据。方法： 20只Wistar大鼠随机分为2组，分别为黄芪组和空白组。制备黄芪药液浓度为1.O3g/ml（给药剂量＝临床常用量×动物等效面积系数×5），空白组给予等剂量生理盐水灌胃每日给药2次，早晚各一次，连续给药1周，于末次给药后1h心脏取血离心备用。将冻存HUVEC复苏后,对HUVEC培养、传代。将HUVEC与单味黄芪含药血清不同剂量浓度（2%、4%、6%）一起培养。 实验分为5组：空白血清组:在空白血清培养液中连续培养26h；模型对照组组：在基础培养液中连续培养24h后，加入100μmol·L - 1H2O2作用2h；（H2O2的浓度及作用时间均为预实验结果）；黄芪含药血清2%组：在基础培养液中加入2%黄芪含药血清培养24h后加入H2O2作用2h；黄芪含药血清4%组：在基础培养液中加入4%黄芪含药血清培养24h后加入H2O2作用2h；黄芪含药血清6%组：在基础培养液中加入6%黄芪含药血清培养24h后加入H2O2作用2h；通过MTT法及形态学方法观察不同浓度黄芪含药血清对H 2 O 2损伤HUVEC生长活性变化。 结果: 黄芪含药血清2%、4%、6%各组细胞OD值均较H2O2模型对照组明显升高，与H2O2模型组相比较均有统计学意义（p <0.01）。4%浓度组较为明显，而在6%时最为显著。且2%、4%、6%组间比差异有统计学意义（p<0.05）。形态学：2%组：胞体积变小，间隙明显变大，彼此之间联系较少，细胞脱落明显，细胞变形、皱缩的程度有所改善；4%组：细胞体积变小，间隙变大，但彼此之间存在联系，部分细胞脱落；皱缩的程度改善最为明显；6%组：细胞体积变小，间隙变大，但彼此之间存在联系，脱落细胞较少；皱缩的程度明显改善；结论： 1黄芪含药血清可以促进H 2 O 2损伤人脐静脉内皮细胞的增殖，增强HUVEC抵制氧化损伤能力，逆转和改善内皮功能障碍，具有一定剂量依赖关系。 2对于预防HUVEC氧化损伤具有明显的促进作用，这可能是其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制之一。