藏药波棱瓜子木脂素类成分系统研究

波棱瓜子系葫芦科植物波棱属植物波棱瓜Herpetospermum caudigerun Wall的干燥成熟种子。为藏医常用药,该藏药性寒,味苦,有泻肝火、胆热、解毒的功效,生长在海拔2300-3500m处,主产于四川、云南、西藏及印度等地。近年来,对波棱瓜子的药理作用研究表明,其有效木脂素部位及部分单体在抗肝损伤和肝炎方面有良好作用,本研究通过对波棱瓜子木脂素类成分的系统研究,为波棱瓜子质量标准的建立及其进一步的开发利用提供前期研究基础。 本研究采用80%乙醇回流提取波棱瓜子干燥种子,用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取得到各部位；并对约146g的乙酸乙酯部位进行分离,利用常压正相硅胶色谱法、反相硅胶色谱法、凝胶Sephadex LH-20、重结晶等分离纯化手段分离,得到15个单体化合物,通过TLC、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、ESI-MS、二维核磁共振等波谱分析方法鉴定了11个化合物的结构,分别为Herpetetrone (1)、Herpetal (2)、Herpetin(3,波棱素)、Herpetfluorenone(4,波棱芴酮)、BL-6(6)、Herpetrione(7,波棱甲素)、Herpetotriol (8)、(-)-tanegool-7'-methyl ether(10)、Herpetetrol(11)、BL-13(13)、Herpepentol(15)。11个化合物均为木脂素类化合物,其中化合物6和化合物13为新化合物,化合物10为首次从该植物中分离得到。 本研究通过高效液相色谱法对分离得到的化合物进行分析,分别测定了3批波棱瓜子中波棱芴酮、Herpetotriol、波棱素和波棱甲素的含量。测定波棱芴酮,方法为Kromasil C18(4.6mm×150mm,5μm),流动相为：乙腈-水(24：76),检测波长为260nm,柱温40℃,流速1ml/min。波棱芴酮的线性方程为y=5966.0x-2492.80,r=0.9999,在0.0294-0.147ug范围内线性关系良好；测定Herpetotriol,方法为Kromasil C18(4.6mm×150mm,55μm),流动相为：乙腈-水(24：76),检测波长为277nm,柱温40℃,流速1ml/min。Herpetotriol的线性方程为y=3395.4x-13353,r=0.9998,在0.62～3.1ug范围内与峰面积线性关系良好；测定波棱素和波棱甲素,方法为Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为：乙腈-水(23：77),检测波长为230nm,柱温30℃,流速1ml/min。波棱素的线性方程为y=10309x-24381,r=0.9998,在0.4708-4.5540ug范围内与峰面积线性关系良好,波棱甲素的线性方程为y=11433x-30560,r=0.9997,在1.664-8.32ug范围内与峰面积线性关系良好。测定结果表明本研究所采用的3批波棱瓜子药材中平均含有波棱芴酮约为0.135mg/g,Herpetotriol约为2.66mg/g、波棱素约为1.73mg/g和波棱甲素约为5.0mg/g。所采用色谱方法操作简单、重复性好、精密度良好,为藏药波棱瓜子的质量控制提供一定的参考。