目的建立中药复方指纹图谱一种定性定量分析法:总量统计矩方法。
方法运用统计矩原理阐明建立中药复方多成分指纹图谱定性定量分析关系式;并以补阳还五汤为模型建立验证该方法;参数采用EXCEL软件处理。
结果建立了中药复方多成分体系指纹图谱的总量统计矩分析数学模型:包括四个参数①总量零阶矩AUCT;②总量响应率AUCPWT;③总量一阶矩MIVVT,亦总量中心矩或总量平均保留时间,用λr,i=n向表示,为各单个成分中心矩或保留时间λj,i=1与响应系数Kr,j和构成比Kc,j的算术平均值;④总量二阶矩VIVVT,亦为平均保留时间方差,用(?)表示,亦为各单个成分方差(?)与保留时间λj,i=1、总量中心λr,i=1、响应系数kr和构成比K构成函数多项式,总标准差σr,t=m为总方差的平方根。以补阳还五汤HPLC指纹图谱的建立为研究目标,对HPLC的系统适应性、检测波长、积分阈值、仪器的精密度、对照药材的稳定性、线性关系、加样回收率、加合性进行了全面的方法学研究,确定检测波长为264nm;用乙腈(100%→0%)与水(0%→100%)进行梯度洗脱;指纹图谱的积分阈值:峰宽、响应率、最小峰面积、最小峰高分别为26s、30μVs-1、8600μVs、500μV;仪器精密度RSD%(?)为3.220%,σT,n=1为7.998%;样品须在10h内进行测定;线性回归方程为AUCT=1.353×106CT1.254×107(r=0.9775);单个标准品的平均加合性为104.4%,而单味药材的平均加合性为45.48%;整方加样回收率的AUCT测./AUCT加均值为98.32%,MVVT测./MIVVT加均值为68.95%;在上述色谱条件下,十批药材补阳还五汤纯成分的平均AUCT为1.976×107μv·sec; AUCPWT为3.807×104μv·sec mg-1; MIVVT为13.72min,VIVVT为15.74min2。
结论统计矩原理可用来刻划多成分(峰)曲线性的特征,AUCT能用于中药复方指纹图谱定量分析,AUCPWT、MIVVT、VIVVT能用于中药复方指纹图谱定性分析。与指纹图谱相似度分析法比较,本法具有对指纹图谱进行加合性分析的功能,能用来快速判断中药复方配伍后新成分的产生与否。