桃红四物汤通过TGF-β信号通路干颈小鼠早期骨折愈合的实验研究

目的通过影像学(X-ray、Micro-CT)、组织病理学(HE染色)和形态计量学、分子生物学(qPCR、Western Blot)等联合观察分析桃红四物汤对骨折愈合的影响和可能的机制,为丰富桃红四物汤在临床的应用提供依据,完善对中医药"骨折三期治法"的理论研究。方法选用正常C57小鼠100只,雄性,体重为20～24±2g,在无菌条件下对小鼠实施胫骨开放性骨折术,经X线胫骨正侧位片筛选后,剔除不合格小鼠,补充至实验需要数量,随机分为对照组、实验组,各组依据5个不同时间点再随机分为5组。术后实验组给予桃红四物汤,对照组给予同体积生理盐水。分别于造模后第4天、7天、10天、14天、21天记录小鼠体重变化、活动能力评分,并通过X线、Micro-CT、组织病理学和形态计量学、分子生物学等手段综合评估桃红四物汤对小鼠骨折愈合的影响,探究其可能的机制。结果 1.X线结果显示:骨折线模糊程度实验组和对照组之间在术后第10、21天差异显著(P<0.05)。2.骨性骨痂体积比在术后7、10、14天实验组均显著高于对照组(P<0.05)。3.骨痂骨量在术后7、10、14天实验组显著优于对照组(P<0.05)。4.骨痂骨性成分比例在术后第7、10天实验组显著高于对照组(P<0.05),并于术后第7天到峰值。5.骨痂软骨成分比例在术后第7、10、14天实验组显著优于对照组(P<0.05)。6.实验组小鼠体重、活动能力的恢复均快于对照组。7.实验组小鼠术后第4天Co12a1表达高于对照阻,Col1Oa1于术后第7天高于对照组,Runx2和Osteocalcin于术后第14天高于对照组(P<0.05)。8.实验组小鼠术后第4天pSmad2蛋白水平上调,较对照组有明显差异P<0.05)。结论 1.桃红四物汤可促进小鼠开放性胫骨骨折愈合,缩短骨折愈合时间。2.桃红四物汤促进骨折愈合的机制可能是在骨折早期上调了pSmad2磷酸化水平,从而激活TGF-β信号。