第一部分BTW5对体外培养日本血吸虫成虫及童虫杀虫效果观察
目的观察BTW5对体外培养的日本血吸虫成虫和童虫的杀灭效果。
方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴5周后用肝门静脉灌注法收集雌、雄成虫,感染尾蚴18d后肝门静脉灌注法收集童虫,体外培养于DMEM培养液中,加入不同浓度BTW5连续培养3d,观察虫体死亡及活力降低情况,并设空白对照组。虫体盐酸卡红染色,观察其损伤情况。
结果在含不同浓度BTW5的DMEM培养液中,成虫及童虫死亡率与活力降低率均显著高于对照组(P<0.05)。盐酸卡红染色直观显示BTW5对雌雄虫的体表和肠管有损伤作用,另外对雌虫的卵巢也有损伤。
结论BTW5具有体外杀灭日本血吸虫成虫和童虫的作用。
第二部分BTW5对小鼠体内培养的日本血吸虫作用的研究
目的观察药物BTW5对小鼠体内培养的日本血吸虫的杀灭效果。
方法分3批实验,每批6组,每组10只。第1批是感染后9d给药,第2批是感染后24d给药,第3批是感染后35d给药。在9d组,24d组和35d组中各有三组尾静脉注射3个剂量的BTW5,分别为50mg/kg,100mg/kg和200mg/kg,每天1次,连续5d;吡喹酮组灌服吡喹酮混悬液,剂量为300mg/kg,每天1次,连续3d;空白对照组,感染后不给药。感染7w后剖杀小鼠,收集虫体计数,计算减虫率和减雌率。将肝脏消化计算减卵率并制作肝组织切片,在光镜下观察BTW5引起的肝脏肉芽肿的变化。
结果BTW5组检获平均虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05),BTW5组检获平均雌虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。显微镜下,给药组的肝切片中可见较少肉芽肿,且细胞索排列整齐,肝细胞无明显病变。
结论低剂量(50mg/kg),中剂量(100mg/kg)和高剂量(200mg/kg)BTW5对小鼠体内3个不同发育阶段的日本血吸虫均有不同程度的杀灭作用,在同一剂量条件下对35d龄成虫杀灭效果最好;不同剂量的BTW5作用于小鼠体内同一发育阶段的日本血吸虫,高剂量的杀虫效果最好。
第三部分白头翁的五种提取物对小鼠体内培养的日本血吸虫作用的研究
目的体内观察白头翁的5种提取物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ对小鼠体内培养的不同发育阶段日本血吸虫的杀灭效果。
方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴后,随机分组,分3批实验,每批6组,每组10只。第1批是感染后9d给药,第2批是感染后20d给药,第3批是感染后35d给药。这3批中的各5组实验组小鼠分别尾静脉注射白头翁的5种提取物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,剂量都为200mg/kg,每天1次,连续5d;;吡喹酮组灌服吡喹酮混悬液,剂量为300mg/kg,每天1次,连续3d;空白对照组,感染后不给药。感染7w后剖杀小鼠,收集虫体计数,计算减虫率和减雌率。
结果在5d组中,各组检获平均虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ组检获平均雌虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。在20d组中,Ⅰ和Ⅲ组检获平均虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05);Ⅰ组检获平均雌虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。在35d组中,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ组检获平均虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05);各组鼠的检获平均雌虫数与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。
结论提取物Ⅴ对35d龄成虫和雌虫的杀灭效果最好。