酒精性肝病的中医证候及中药抗酒精性肝纤维化的作用机制研究

目的：酒精性肝病(Alcoholic liver disease, ALD)是由于长期大量饮酒导致中毒性肝损伤及一系列病变,是临床的常见病。本研究运用流行病学的方法和原则,探讨酒精性肝病的中医证候特点的分布,及其与临床资料的相关性。通过大鼠酒精性肝纤维化模型,观察中药复方对酒精性肝纤维化的影响,探讨中药抗肝纤维化作用机制。 方法：1.理论研究：一部分总结了中医对酒精性肝病病因病机的认识及中医药治疗酒精性肝病的临床研究,另一部分论述了酒精性肝纤维化的发病机制。2.临床研究：应用统计软件分析患者的临床信息,运用因子分析的方法,观察酒精性肝病的中医证候特点的分布情况,以及酒精性肝病的影响因素。3.实验研究：将雄性Wistar大鼠随机分为2组：空白组和模型组。采用“白酒、植物油、吡唑”混合液灌胃法制备酒精性肝纤维化动物模型,造模时间为16周。模型组造模结束后,随机分为5组,即模型组、模型自逆组、阳性药治疗组、高剂量慢肝消治疗组、低剂量慢肝消治疗组。治疗组治疗3周后,取血和肝组织,检测血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶、白蛋白、总蛋白、Ⅰ型胶原、层粘连蛋白、透明质酸、Ⅰ型前胶原氨基端前肽、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽、Ⅲ型前胶原蛋白、纤维结合蛋白的含量,肝组织行HE染色、Mallory染色及PCNA、Ⅰ、Ⅳ型胶原、LN免疫组化染色。采用SPSS18.0软件对血清学指标检测结果和病理图像分析结果进行统计学分析。 结果与结论：1.临床研究：本次收集的病例中,男性与女性的比例为6：1,年龄在35-44岁和45-54岁这两个年龄组,日饮酒量80-119g／d,饮酒年限在10-19年,GGT在50-89u／L时,酒精性肝病的患者居多。酒精性肝病的患者证侯分型以肝气郁滞、湿热内蕴、肝郁脾虚、痰湿内阻及痰瘀互结为主,其中肝郁脾虚及湿热内蕴所占的比例最多。年龄、饮酒年限、AST/ALT值对酒精性肝病中医证候特点的分布有影响,且有显著性差异(p<0.05)。而体重指数、日饮酒量对酒精性肝病中医证候的分布无影响。初步表明酒精性肝病的中医证候特点与肝脏的损伤情况密切相关。2.实验研究：模型组大鼠,血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、Ⅰ型胶原、层粘连蛋白、透明质酸、Ⅰ型前胶原氨基端前肽、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽、纤维结合蛋白的含量显著升高(p<0.05或p<0.01),血清中总蛋白、白蛋白、Ⅲ型前胶原蛋白无显著变化(P>0.05)。肝组织内大量胶原沉积,呈现典型肝纤维化病理特点。药物治疗组大鼠血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、Ⅰ型胶原、透明质酸、Ⅰ型前胶原氨基端前肽、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽的含量显著降低(p<0.05或p<0.01)。肝组织内胶原大量减少,肝小叶结构基本完整,未见假小叶。免疫组织化学结果表明,模型组大鼠肝组织PCNA免疫组化染色,可见大量增殖的细胞核,Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原及层粘连蛋白阳性反应颗粒显著增多,药物治疗后大鼠肝组织PCNA免疫组化染色,可见肝细胞核增殖减少,Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原及LN阳性反应颗粒显著减少。说明慢肝消有保护细胞膜的作用,能抑制细胞核的过度增殖。可以有效的作用于Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸、Ⅰ型前胶原氨基端前肽、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽及层粘连蛋白等,从而抑制细胞外基质的沉积,达到抑制肝纤维化的目的。