玉屏风散的化学部位配方与药效的相关性研究

复方新制剂研制的核心问题之一是对复方物质基础的研究。以往复方物质基础研究思路的最大问题,是没有重视“配伍”在中医方剂中的重要作用,由于配伍,方中各化学部位间可能产生化学成分的变化,或某些成分丢失,或溶出增加,各部位以适宜的浓度范围和比例,产生整体增效及减毒作用。 由导师提出的“以认识特定药效条件下复方化学部位的配伍关系来探讨复方的药效基础”的观点,是对物质基础研究方法学的全新诠释,最大程度的体现了中医复方一方多效和药物配伍的特性。 本课题建立在上述“配伍”思路的基础上,探索玉屏风散的大体化学部位配方和药效的关系。玉屏风散善治表虚易感,是预防感冒(流感)的一个经典处方,玉屏风散增强免疫功能的作用屡有报道。课题组前期通过对玉屏风散的药物的不同配比处方及不同提取方式进行免疫活性和抗病毒作用的筛选,得出了玉屏风散药物配比黄芪:白术:防风为4:4:1的处方的水提物有着相对较好的药理活性。 目的 以复方的提取,化学与药效同步研究为思路,选用经典复方玉屏风散为研究对象,以优化免疫增强和抗病毒作用的复方化学部位配伍为主攻方向,通过对复方化学部位的分离与优化重组,发现玉屏风散预防呼吸道病毒感染性疾病的物质基础,探索以复方多药味和多化学组分相互作用为背景,以优化复方化学部位配伍为目标,全新的复方物质基础的研究模式。 方法 1.玉屏风散的化学部位的提取制备根据玉屏风散的有效成分的理化性质,用萃取的方法将玉屏风散的水提物分为乙酸乙酯提取物,正丁醇提取物,乙醇沉淀物,乙醇提取物四种极性不同的化学部位。 2.玉屏风散的化学部位配方的免疫活性和抗病毒作用按正交设计表L8(27)来安排实验方案,各化学部位配伍后作用于正常小鼠,取含药血清,以免疫活性指标即腹腔巨噬细胞吞噬率、巨噬细胞释放NO能力、脾脏T淋巴细胞增殖率、脾脏B淋巴细胞增殖率为指标,筛选玉屏风散优化的化学部位配方;同时以流感病毒感染性肺炎小鼠的肺指数作为抗病毒指标筛选玉屏风散优化的化学部位配方,综合两者结果,得出初步的优化部位配方。 3.玉屏风散的化学部位配方的免疫增强作用的在体实验研究在上面实验基础上,将筛选出的配方作用于正常小鼠,以体内免疫活性即胸腺指数、脾指数、巨噬细胞吞噬率、脾脏T淋巴细胞增殖率为指标,进一步验证确认所获得的一个或数个有效部位配方的免疫增强作用。