玉米幼芽提取物对小鼠急性四氯化碳肝损伤的保护作用研究

关于肝损伤的机制及对其防治的研究,是目前国内外生物学、医学研究的焦点之一。玉米幼芽提取物的主要成分为激动素,前期实验已发现玉米幼芽提取物能显著增强果蝇的抗应激能力(如高温、低温、饥饿等),增加果蝇的吃食量,延长其寿命。在家蚕上的实验也证明玉米幼芽提取物可以十分明显地提高家蚕的SOD活性,保持细胞形态结构及保护质膜钙离子通道,有效地促进家蚕细胞抵抗氧化损伤中氧自由基对细胞的损害作用。目前尚未见到有关对玉米幼芽提取物急性肝损伤保护作用方面的研究报道。本论文复制小鼠的CCl4急性肝损伤模型,同时给予玉米幼芽提取物,观察其对肝细胞损伤的保护作用,并对其作用机制进行了初步探讨。 一、本实验利用CCl4建立小鼠急性肝损伤实验动物模型,并灌胃玉米幼芽提取物观察其对实验鼠肝细胞损伤的保护作用。结果表明,模型组与空白对照组比较,血清ALT及AST均明显增高、肝组织丙二醛含量明显增高。模型组小鼠肝细胞索排列紊乱,多数肝细胞呈细胞水肿,出现脂肪变性,可见灶状肝细胞坏死并伴有炎细胞浸润,上述结果表明小鼠急性肝损伤实验动物模型建立成功。 玉米幼芽提取物高、低剂量组(40、20 mg·Kg-1·d-1)与模型组相比,血清ALT、AST明显降低,血清Alb含量明显升高。玉米幼芽提取物可明显降低肝损伤小鼠肝组织丙二醛和NO含量,提高肝组织SOD、CAT、GSH-px等抗氧化酶的活性,其中玉米幼芽提取物高剂量组ALT和AST较模型组分别降低37.3%和24.1%,Alb较模型组升高25.7%,CAT、SOD和GSH-px活性与模型组比较差异均非常显著(P<0.01),分别上升55.3%、42.1%和62.5%。玉米幼芽提取物各剂量组肝小叶结构基本完整,细胞排列整齐,偶见炎细胞浸润,较模型组显著改善,肝细胞核基本正常,核周隙清晰,线粒体清晰可见,嵴减少较模型组明显改善接近空白对照组,灶性红细胞瘀积现象消失。 上述结果表明,玉米幼芽提取物能够抵抗CCl4所致小鼠急性肝损伤,其作用的发挥与清除自由基、抑制脂质过氧化、提高抗氧化酶活性、维持细胞膜完整性有关。 二、本实验利用CCl4建立小鼠原代培养肝细胞损伤模型,并在培养液中添加玉米幼芽提取物观察其对鼠肝细胞损伤的保护作用。结果表明,模型组与正常对照组比较,细胞培养上清液ALT及AST均明显增高、丙二醛含量也明显增高。模型组肝细胞可见大片脱落细胞碎片,细胞质回缩,细胞间隙增大,HE染色后在光学显微镜下观察到,细胞染色质浓缩边集,核膜裂解、细胞周围可见多个完整膜包裹的凋亡小体,细胞肿胀崩解,形态不规则,上述结果表明小鼠原代培养肝细胞CCl4损伤模型复制成功。 与模型组相比,玉米幼芽提取物各剂量组(40、20、10 mg·L-1)细胞培养上清液ALT、AST明显降低,Alb含量明显升高,玉米幼芽提取物可明显降低损伤细胞培养上清液丙二醛和NO含量,提高其SOD、CAT、GSH-px等抗氧化酶的活性,其中玉米幼芽提取物高剂量组ALT和AST较模型组分别降低35.1%和35.3%,CAT、SOD和GSH-px活性与模型组比较分别上升44.6%、33.5%和42.7%,MDA和NO含量与模型组比较分别下降26.6%和29.1%,上述指标与模型组相比差异均非常显著(P<0.01)。玉米幼芽提取物各剂量组中可见到小片坏死脱落细胞碎片,但细胞密度明显大于模型组,细胞形态完整,偶可见凋亡细胞。同时玉米幼芽提取物能提高损伤细胞Bcl-2表达水平,核转录因子NF-κB出现核移位现象,且表达量明显高于模型组。 上述结果表明,玉米幼芽提取物能够抵抗原代培养肝细胞CCl4损伤,其作用的发挥与抑制脂质过氧化、促进抗氧化酶基因转录、提高抗氧化酶活性、维持细胞膜完整性、抑制细胞凋亡和提高细胞存活率有关。