花生的SRAP分子遗传连锁图谱构建

花生是我国重要的油料和经济作物，在农业生产和国民经济发展中地位举足轻重。提高产量、改进品质和提高效益是我国花生生产及科研发展的核心任务，利用高新技术对花生品种进行遗传改良是今后花生育种和科研工作取得突破的关键。DNA分子标记的兴起为花生研究注入了活力，相对其它作物而言，现代高新技术在花生中的应用还较少。最初在花生上使用的标记主要为RFLP和RAPD标记，近些年来的AFLP、DAF、SSR等技术的兴起为花生的DNA遗传多样性研究提供了更多的手段。同时在花生遗传连锁图谱构建方面已经有了一定的发展，构建了几张遗传连锁图谱，但是这些都是在野生种的基础上建立起来的，至今还没有一张完全意义上关于花生栽培种品种间的分子遗传连锁图谱。利用这些图谱对于花生栽培种中一些重要的农艺性状和经济性状的研究存在很大的难度，所以构建以花生栽培种品种之间杂交为基础的分离群体进行遗传图谱构建很有必要。本研究采用新型的SRAP分子标记对花生栽培种（异源四倍体）进行了遗传连锁图谱构建。具体所得结果如下： 1．SRAP分子标记在花生遗传研究中的应用 SRAP（Sequence-related Amplified Polymorphism）是一种新型的基于PCR的标记系统，通过独特的引物设计对ORFs（open reading frames）进行扩增。该标记具有简便、稳定、中等产率、可产生共显性标记、便于克隆测序目标片段的特点。目前，SRAP标记已被应用于图谱构建、比较基因组学、遗传多样性分析和基因定位的研究。 本研究将SRAP标记应用于花生的遗传研究。在对SRAP引物筛选的研究实验中，借鉴SRAP标记在棉花上的已经较稳定的PCR反应体系，同时在反应体系中加入了BSA以增强扩增的稳定性和高产率，通过多次的重复实验与不断改善，建立并优化了一套适合于花生SRAP标记分析的重复性好、扩增效果好、稳定可靠的PCR反应体系。 2．花生的SRAP分子遗传连锁图谱构建 用SRAP对豫花4号和郑8903进行多态性筛选，结果表明SRAP标记在两个亲本之间表现出很强的多态性，每个引物组合可产生20～30个左右清晰可辨的条带。选取多态性好的78个引物组合进行群体分析，共得到287条多态性条带，平均每个引物组合产生3.68个多态性条带。每组合的多态性条带数从1～9不等。对得到的经过x2测验后的253个多态性标记进行连锁分析，构建花生遗传连锁图。223个标记进入22个连锁群（LOD≥3.0），总长2129.4cM。标记间平均图距为9.55cM。标记间的最大距离