纳米银—活性炭纤维敷料抗菌及促进创面愈合作用的实验研究

一、研究背景 促进创面愈合，一直是外科领域内研究十分活跃的课题。其中，创面感染的治疗是最主要的环节之一。创面感染不仅破坏局部正常组织，延迟创面愈合，还会引起严重的并发症，对患者的全身状况造成不良影响。因此，控制感染创面，加强抗菌，成为研究的重点。 目前，临床普遍采用口服或静滴抗生素或含抗生素药物的敷料对感染创面进行抗菌治疗。虽然抗生素抗菌起效迅速，但长期使用抗生素会对细菌产生耐药性。纳米银-活性炭纤维敷料的出现，可以很好地同时解决抗菌和耐药这两个问题。 纳米银是将传统的银制备成纳米量级的颗粒后，由于银本身的杀菌活性和纳米技术本身的特异性如小尺寸效应、量子效应、表面效应等，杀菌活性将成倍提高,且安全性高、效力持久，是一种具有长效性的抗菌剂。此外，纳米银又是非抗生素类杀菌剂。目前没有任何细菌对银产生耐药性。 活性炭纤维是以有机纤维为前驱体通过不同途径而制得的一种新型功能性纤维，具有成型性好，耐酸、碱，电导性与化学稳定性好等特点。其不仅比表面积大、孔径适中、分布均匀及吸附速度快，而且具有不同的形态。 纳米银-活性炭纤维敷料是用离子交换法将纳米量级的银酌床在活性炭纤维内部而研制的一种新型抗感染敷料。研究表明，在活性炭纤维上负载适量的银物质，可以有效地杀灭微生物，也抑制了微生物在活性炭纤维表面的繁殖。这样，既能发挥活性炭纤维优异的吸附性能，又增加了活性炭纤维的抑菌杀菌功能。 二、研究目的 1、观察纳米银-活性炭纤维敷料的体外抗菌效果，明确其抗菌能力。 2、动物实验证实纳米银-活性炭纤维敷料的抗菌以及促进创面愈合作用，为临床应用提供参考。 三、研究内容和方法 1、抑菌环法从孵育18～24h的血平板培养物中，挑取4～5个菌落，制成1×10～9～2×10～9cfu/ml的菌悬液。用棉拭子沾取菌悬液在MH平板上依3个方向（转60°）涂划，以保证接种物均匀分布。接种菌液后，待琼脂表面水分稍干后，即按要求贴上灭菌直径为10mm的nAgACF敷料、纳米银敷料、碳纤维敷料以及普通敷料这四种敷料片，15min内放入35℃孵箱孵育18～24h，观察抑菌圈大小。 2、平板计数法分别称取0.75g nAgACF敷料、纳米银敷料、碳纤维敷料以及普通敷料，放入四个250ml烧瓶中，然后将70mlPBS和5ml菌悬液加入烧瓶，使菌悬液浓度为1×10～4cfu/ml。将烧瓶振荡1小时候见后取出0.5ml倾皿计数，计算抑菌率。 3、动物实验建立大鼠感染创面模型；根据创面不同处理方式分为四组(实验组：nAgACF敷料，对照组:纳米银敷料、碳纤维敷料，空白组：普通敷料)，常规换药，定期做创面细菌培养、测量创面大小以及切取组织样本，观察一般情况、创面抑菌率及愈合率，镜下炎细胞、成纤维细胞等方面的情况。 四、研究结果 1、碳纤维敷料和普通敷料无明显抑菌圈。纳米银敷料对EC、 SA、 PSA的抑菌圈均数分别为13.4mm、11.5mm、10.6mm，nAgACF敷料对EC、SA、PSA的抑菌圈均数分别为14.6mm、12.7mm、11.5mm。与对照组相比，nAgACF敷料对三种细菌的抑菌圈最大，与其他三组相比有统计学意义(p<0.01)。 2、对EC、 SA、 PSA的抑菌率均数比较， nAgACF敷料分别为83.42%、82.14%、78.10%，纳米银敷料为74.75%、73.36%、71.72%，碳纤维敷料为4.52%、7.71%、6.68%，普通敷料为2.67%，3.62%、3.6%。与对照组相比，nAgACF敷料对三种细菌的抑菌率最高，与其他三组相比有统计学意义(p<0.01)。 3、一般情况观察，nAgACF敷料组大鼠饮食摄水活动较其他组好。创面抑菌率和愈合率，第3天和第7天各组差别不明显，第14天和21天nAgACF敷料组最高，与其他三组相比有统计学意义(p<0.01)。经创面病理组织切片观察，发现nAgACF敷料组创面炎细胞比其他三组少，成纤维细胞、胶原纤维比其他三组多。未见局部致敏和全身症状。 五、结论 本课题的nAgACF敷料有良好的体外抗菌作用，对实验动物感染创面有较强的抗感染和较快的促愈合作用，动物实验证实该敷料对感染创面EC、SA和PSA和的抑制率、创面愈合率、加快上皮细胞增殖方面与其他敷料相比均表现出明显的优势，是目前临床上较为理想的创面敷料。