目的:本项目研究旨在探讨紫锥菊最优提取工艺及其提取物对正常小鼠和免疫抑制小鼠的免疫调节作用,为紫锥菊在兽医临床上的开发应用提供理论基础。方法:1、紫锥菊提取工艺优化及主要有效成分含量测定利用乙醇回流法对紫锥菊提取工艺进行研究,试验采用正交实验法分析了料液比、提取时间、溶剂浓度和温度对紫锥菊中菊苣酸含量有主要影响的四个因素,并利用高效液相色谱法进行含量测定,确定紫锥菊中菊苣酸的最优提取工艺。2、紫锥菊提取物对小鼠的免疫调节研究本试验选择昆明小鼠80只,体重20±2g,随机分成8组(每组10只,雌雄各半,分开饲养),分别为:空白组、低、中、高剂量试验组(分别为紫锥菊提取物0.05mg/g/d、 0.1mg/g/d、0.2mg/g/d),以及免疫抑制模型组、低、中、高免疫抑制试验组(分别为紫锥菊提取物0.05mg/g/d、0.1mg/g/d、0.2mg/g/d);试验开始前,除空白组外,其余各试验组连续3天腹腔注射环磷酰胺溶液(0.1mg/g/bw),建立小鼠免疫抑制模型,空白组注射等剂量的生理盐水。空白组和免疫抑制模型组灌胃生理盐水0.2mL/d,其余各试验组灌胃对应剂量紫锥菊提取液,连续灌胃四周,末次给药后小鼠禁食12h,处死,分别测定小鼠的脏器指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素以及部分细胞因子(IL-2、 IL-6、TNF-a)含量。结果:1、紫锥菊提取工艺优化及主要有效成分含量测定乙醇回流法对紫锥菊中的菊苣酸最优提取工艺条件:以体积分数60%的乙醇作为提取剂,在料液比为1:15的条件下,90℃提取1h,提取1次,菊苣酸含量为0.484%。该提取工艺要求简单,可行性高,含量鉴定精准,重复性好,能够推广于紫锥菊提取的量化生产。2、紫锥菊提取物对小鼠的免疫调节研究与空白组比较,高剂量紫锥菊提取物能显著提高正常小鼠胸腺指数和脾脏指数(P<0.01,P<0.05);低、中、高剂量紫锥菊提取物均极显著增强正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性(P<0.01)中、高剂量紫锥菊提取物均显著提高正常小鼠血清溶血素含量(P<0.05);低、中、高剂量对正常小鼠的IL-2和IL-6含量无显著影响(P>0.05),中、高剂量紫锥菊提取物显著提高正常小鼠TNF-a含量(P<0.01,P<0.05);免疫抑制模型组的各项免疫指标均显著下降(P<0.01)。与免疫抑制模型组比较,中、高剂量紫锥菊提取物均极显著提高免疫抑制小鼠脾脏指数和胸腺指数(P<0.01);低、中剂量紫锥菊提取物均能极显著增强免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.01);中、高剂量紫锥菊提取物极显著提高免疫抑制小鼠血清溶血素含量(P<0.01);低、中、高剂量紫锥菊提取物均能明显提高免疫抑制小鼠IL-2、TNF-α含量(P<0.01),低、高剂量紫锥菊提取物极显著提高免疫抑制小鼠IL-6含量(P<0.01),其中,高剂量紫锥菊提取物使免疫抑制小鼠的IL-2、IL-6、TNF-α水平分别上升38.49%、41.63%、67.38%。结论:改良后的乙醇回流法提取紫锥菊,工艺要求简单,易操作,提取物中有效成分含量高。紫锥菊提取物能提高正常小鼠和免疫抑制小鼠的免疫功能,相对而言,对免疫抑制小鼠的免疫功能的调节作用更好。