白藜芦醇及其二聚体的制备以及在葡萄果实生长中的变化研究

白藜芦醇及其二聚体衍生物是葡萄在抵御真菌侵染、机械和紫外线等伤害时产生的植保素次生代谢产物,对人类健康特别是预防心血管疾病等方面具有显著功效。 本试验研究了利用白藜芦醇苷水解产生白藜芦醇、利用白藜芦醇化学氧化聚合产生白藜芦醇二聚体的实验方法,建立了白藜芦醇及其衍生物的薄层层析-紫外分光光度法(TLC-UV)测定方法;并以酿酒葡萄品种(系)蛇龙珠(Carbernet Gernischet)为材料,研究了紫外线处理对果实的白藜芦醇及其二聚体和相关酶活性的影响;研究了果实生长发育过程中白藜芦醇及其二聚体的变化与相关酶活性间的关系。主要研究结果如下: 1.通过单因子和多因子的正交试验,确定了白藜芦醇苷酸解产生白藜芦醇的最佳酸解工艺条件是:65℃,8%盐酸,70%甲醇,反应5 h。 2.研究了适合白藜芦醇及其二聚体分离纯化的展开剂条件;建立了利用薄层层析-紫外分光光度法(TLC—UV)定性及定量葡萄中白藜芦醇及其二聚体的试验方法。方法学研究表明,采用TLC—UV法测定葡萄中白藜芦醇及其二聚体的含量,方法可行、准确度高、稳定性好、回收率高。 3.比较了常温提取、冷冻提取和热烫提取等三种方式从葡萄果皮中提取白藜芦醇及其二聚体的效果。结果表明,冷冻提取可明显提高白藜芦醇及其二聚体的含量。 4.研究了紫外线(UV)辐射对葡萄中白藜芦醇及其二聚体合成的诱导作用。研究表明,UV诱导能提高果实中白藜芦醇及其二聚体的含量,UV的适宜辐射时间为300s。UV辐射后在25℃下黑暗中贮存24h,可使白藜芦醇含量提高3.7倍,白藜芦醇二聚体含量提高5.25倍。 5.研究了葡萄果实生长发育过程中白藜芦醇及其二聚体与苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)之间的关系。结果表明,果实生长发育过程中,蛇龙珠果实的白藜芦醇含量和PAL活性的最高峰均出现在转色期,说明PAL和果实中的白藜芦醇的形成存在一定的相关性。蛇龙珠果实的白藜芦醇二聚体随果实生长而逐渐增长,绿果期和转色期含量较低,到成熟期达到最高;而POD活性也呈现出相同变化趋势,说明POD和果实中白藜芦醇二聚体的形成存在一定的相关性。