柱层析法分离西洋参及人参发根中人参皂苷Rb1

人参发根是经发根农杆菌A4 菌株浸染人参外植体遗传转化而成,属非天然植物。人参发根在液体培养基上生长速率快,培养四周人参总皂苷含量就达到栽培三年生人参根总皂苷含量,而发根中人参皂苷Rb1含量接近栽培六年生人参根中Rb1含量,且其在总皂苷中的比例很高,达到50%左右。本文是人参发根的下游工程,主要是为了从人参发根中分离得到人参皂苷Rb1单体,利用柱层析技术对人参(西洋参)及人参发根中人参皂苷Rb1进行了分离研究。 本文对人参发根进行了继代和扩大培养,为提取分离人参皂苷Rb1提供材料。同时进行了人参(西洋参)总皂苷提取,应用柱层析法分离人参皂苷Rb1,通过洗脱对比实验,确定洗脱剂最终比例为氯仿∶甲醇=7.5∶2.5。然后进行人参发根总皂苷提取,应用西洋参所确定的最终洗脱剂比例分离人参发根总皂苷中人参皂苷Rb1。经高效液相色谱--质谱检测,其结构与西洋参中人参皂苷Rb1 的结构相同。最后对两种材料所得Rb1 进行对比,结果人参发根更有利于人参皂苷Rb1的产业化生产,可全面降低成本,提高利用价值。 本文主要侧重研究柱层析法分离提纯应用生物技术得到的人参发根中人参皂苷Rb1,此前未曾报导。本文的研究成果可为大规模制成单体皂苷制剂,实现真正意义上的中药现代化做些基础工作。