罗汉果优良品系的选育及组培快速繁殖

罗汉果（Siraitia grosvenorii（Swingle）C.Jeffrey）是广西重要的经济作物。罗汉果果实营养价值高，含有丰富的果糖、葡萄糖、蛋白质和多种维生素，其性凉味甘，具有清热解毒、止咳润肺等功效，已广泛应用于医药、饮料和调味品中。罗汉果甜甙甜度高、热量低、无毒，可作为肥胖病人、糖尿病人、高血压病人理想的食品添加剂。 目前，罗汉果优良品种稀少、种性退化、混杂严重、产量低、品质差。由于罗汉果为雌雄异株植物，种子实生苗中雄株占70%以上，且难以鉴别，限制了罗汉果良种的有性繁殖。采用扦插、嫁接、压蔓等无性繁殖方法，不仅繁殖系数低，且易造成良种的种性退化。在种质有限的条件下不能在生产中大量推广。而用组织培养快速繁殖的方法，不仅可以加速良种繁育，而且能在一定程度上保持母本的优良性状。迄今为止，国内对罗汉果的组织培养研究主要以无菌实生苗为材料，尚未见有关罗汉果成年植株茎段组织培养的报道。为了建立起一套有效的罗汉果无性快速繁殖体系，本文以罗汉果成年植株的茎段为材料，研究了不同外植体与消毒时间对离体组织培养的影响以及外植体的取材季节、取材部位、糖分、激素的种类及浓度对芽的形成和生长的影响，探讨了在不同无机盐浓度、蔗糖浓度和诱导温度条件下，不同暗处理时间以及不同枝条等因素对试管块茎形成与膨大的影响。此外，还进行了组培苗的生根诱导、扦插、移栽、定植等试验，适时观测其大田性状，并测定了罗汉果甜甙V的含量。 试验结果表明，外植体的取材季节、取材部位以及消毒时间均影响罗汉果外植体的灭菌效果。罗汉果外植体的采集以4-5月份母株主蔓未上棚前为宜，污染少，存活率为22.2%, 较其他季节高。同一枝条以中上部茎段较为有利，污染轻，死亡少,存活率为28.3%。用0.1HgCl2消毒时间以10分钟为宜。于4-6月取材，对芽的诱导比较有利。9-11月份，母株基部新抽的嫩枝比较容易诱导芽的形成。在诱导芽的培养基中，添加蔗糖和葡萄糖各1.5%有利于芽的生长。细胞分裂素6-BA的诱导效果比KT、ZT好，6-BA与NAA配合使用有利于芽的形成和伸长，其中以6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L的诱导效果最好，所形成的芽粗壮、伸长快、叶色鲜绿。以6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L为继代培养基，植株生长快，繁殖系数为4.5。无根 苗接种于1/2MS+IBA0.1mg/L，附加0.5%活性炭的液体培养基中，生根快，不定根发育良好。 在试管块茎的诱导中，1/4MS无机盐、6%蔗糖暗处理15-30天，诱导温度为200C，枝条切除顶芽，横放或斜插于培养基中等因素，均有利于块茎的形成和膨大。 在组培苗的扦插生根的试验中，插枝用NAA1.0mg/ml+IBA1.0mg/ml浸泡处理，其生根效果最好，生根较快，根系发育良好，植株成活率高。 组培苗前期长势不及传统苗，开花时间延迟, 但中后期植株的长势比传统苗旺盛，生长期也比传统苗长。组培苗的块茎主要在10-12月份膨大，其一年生块茎粗短，而传统苗一年生块茎细长。组培苗的产量高，当年开花株率达68.7%，单株最高结果282个，平均单株结果数为102.3个，且大中果多，占76.2%，明显高于传统苗。罗汉果组培苗的果实中甜甙V的含量比传统苗提高了39.78%-126.68%。