YAP基因在卵巢肿瘤发生、恶性转移及卵巢癌干细胞中的作用研究

近年研究表明,Hippo-YAP信号通路参与哺乳动物器官大小维持、干细胞全能性维持和肿瘤发生。YAP基因作为Hippo信号通路中的核心转录共激活因子,与人类肿瘤的发生关系密切。TEAD家族是YAP基因下游重要的核内转录因子,它的转录活化水平直接影响YAP基因对其下游靶基因的调控及一系列功能行使。目前,YAP作为癌基因的相关研究仅限于体外,在体研究未见报道。在卵巢癌的发生发展过程中,TEAD家族作为YAP基因下游重要的核转录因子,是否参与了YAP诱导卵巢肿瘤发生的过程,TEAD家族中的几个重要亚型是否也都参与其中,以及临床上YAP与TEAD活性与卵巢癌患者预后的关系目前均未见研究报道。另一方面,YAP同样参与了干细胞的干性维持与调控。YAP的高表达能够维持诱导多能干细胞的未分化状态,YAP的表达水平随着干细胞的终末分化而下降。这些研究均提示YAP也可能在癌干细胞的发生、维持与分化中发挥作用。而癌干细胞的存在可能是肿瘤耐药、复发及转移的主要原因。目前,YAP在卵巢癌干细胞中的作用研究也未见报道。因此,进一步深入了解YAP在卵巢癌干细胞中的作用对于揭示YAP在卵巢癌的发生发展及耐药中的作用机制有重要意义。 本研究通过体外及体内实验验证了YAP基因促进卵巢癌细胞增殖、肿瘤形成及转移,并且与卵巢癌患者的临床预后密切相关。首先,通过对正常卵巢上皮组织及卵巢肿瘤组织检测证实YAP在卵巢癌中高表达。通过病例随访及生存分析我们证明YAP的高表达与卵巢癌患者临床预后相关。接下来通过一系列体内及体外实验证明YAP促进卵巢癌细胞增殖及肿瘤形成,YAP促进卵巢癌细胞耐药性以及远处转移。TEAD4作为YAP下游转录因子,其活性对于YAP发挥促癌作用非常重要。在本研究中我们首次发现YAP基因的表达水平与TEAD4的表达密切相关,卵巢癌组织中YAP/TEAD的共表达水平能够预测卵巢癌患者预后。 已有研究表明YAP信号通路与干细胞全能性关系密切,因此我们推测YAP-TEAD在调节癌干细胞的多能性和自我更新方面可能也起到关键作用。在本研究中我们首次通过体外干细胞分离培养,获得并鉴定了具有干细胞特性的卵巢癌干细胞,首次发现YAP及TEAD家族在卵巢癌干细胞中表达上调,TEAD1、3、4三个亚型参与了YAP对癌干细胞干性维持调控,而TEAD2作用不明显。在干细胞分化方面,我们发现YAP通过结合TEAD活化转录,下调Hippo通路下游靶基因CTGF的表达,上调干细胞干性维持相关基因C-FOS的表达而抑制分化以维持癌干细胞干性。在耐药方面,YAP通过调控GSK3A基因而上调耐药基因ABCB1的表达从而增强卵巢癌干细胞耐药性。在卵巢癌干细胞中,GSK3A参与了YAP对耐药基因的调控而GSK3B并未直接参与,ABCB1确实受到Wnt信号通路中GSK3A的调节。 综上所述,本研究主要论证了YAP作为Hippo信号通路中重要的癌基因,通过结合核内转录因子TEAD促进卵巢癌发生及远处转移,与卵巢癌患者预后密切相关。YAP调节卵巢癌干细胞的增殖和分化而增强癌干细胞耐药性。这一机制可能是卵巢癌发生、远处转移及耐药的根本原因。YAP有望作为临床上卵巢癌化疗的一个新的分子药物靶点,为降低卵巢癌复发及远处转移,提高卵巢癌临床治愈率提供新的思路。