大豆皂苷对D—半乳糖所致衰老小鼠肝脏抗氧化作用的影响

目的：研究大豆皂苷对D-半乳糖所致衰老小鼠肝脏的抗氧化作用的影响。方法：将60只清洁级昆明小鼠进行随机分组,分为空白对照组、D-半乳糖模型组、大豆皂苷低剂量组、大豆皂苷中剂量组、大豆皂苷高剂量组和维生素E阳性对照组。除空白组外其他各组注射300mg/kg的D-半乳糖(D-gal),同时大豆皂苷低、中、高剂量组分别给予25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg大豆皂苷水溶液灌胃,维生素E阳性对照组给予50mg/kg维生素E水溶液灌胃,空白对照组和D-半乳糖模型组灌胃20mL/Kg的生理盐水,连续7周每天不间断。末次给药后禁食不禁水,24小时后对小鼠进行断颈处死,立即取血和肝脏。血清进行8-OHdG的检测。肝脏组织进行HE染色和电镜检测,并检测谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)活性以及线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca+-Mg+-ATP酶和超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,同时通过蛋白印迹法检测P38蛋白激酶(p38)、磷酸化P38(p-p38)、c-Jun N-末端激酶(JNK)、磷酸化JNK (p-JNK)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt (p-Akt)等蛋白的表达。结果：1.血清8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、肝脏HE染色与电镜检测结果显示,D-半乳糖可导致小鼠肝脏衰老,大豆皂苷对D-半乳糖所致小鼠肝脏衰老有延缓作用。2.与空白对照组比较,D-半乳糖模型组肝脏组织匀浆中总谷胱甘肽、GSH含量和GSH-PX、CAT活力明显降低(P<0.01)；与D-半乳糖模型组比较,大豆皂苷用药组总谷胱甘肽、GSH含量和GSH-PX、CAT活力显著增高(P<0.05)。3.与空白对照组比较,D-半乳糖模型组线粒体中Na+-K+-ATP酶、Ca+-Mg+-ATP酶和Mn-SOD活力显著降低,而MDA含量增高(P<0.05)；与D-半乳糖模型组比较,大豆皂苷用药组线粒体中Na+-K+-ATP酶、Ca+-Mg+-ATP酶和Mn-SOD活力显著增高,而MDA含量显著降低(P<0.01)。4. Western blot结果显示,与空白对照组比较,D-半乳糖模型组p-p38MAPK、p-JNK、p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显升高；与D-半乳糖模型组比较,大豆皂苷用药组p-p38MAPK、p-JNK、p-PI3K、p-Akt表达明显降低。结论：大豆皂苷对D-半乳糖诱导衰老小鼠肝脏损伤有减缓作用,其作用机制可能与提高小鼠肝脏的抗氧化能力有关。