抗乙型肝炎病毒藏药及活性部位的研究

目的：从藏药材中寻找抗乙型肝炎病毒的活性物质。 方法：从藏医常用治疗肝胆疾病的药材中选择了毛诃子，余甘子，绿绒蒿，船形乌头，点地梅五种药材。分别用植物化学方法提取分离，制备五种药材的提取物。利用转染了乙型肝炎病毒基因组的HepG2.2.15细胞作为筛选模型，进行活性筛选，以HepG2.2.15细胞培养上清中HBsAg、HBeAg抗原分泌变化作为指标，评价提取物抗乙肝病毒活性。毛诃子，余甘子，绿绒蒿，船形乌头，点地梅五种药材经粉碎处理，分别用95％乙醇浸泡过夜，制备得到五种药材的95％乙醇提取物。利用HepG2.2.15细胞模型，检测药物作用8天后，细胞培养上清中HBsAg、HBeAg以及HBV DNA含量的变化，用活性筛选结果指导下一步的分离工作。毛诃子95％乙醇提取物加水，得混悬液，分别用石油醚(沸程60-90℃)、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水溶部位。四溶剂部位用HepG2.2.15细胞模型进行活性筛选。毛诃子石油醚部位进行硅胶柱层析，先后以石油醚、石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯、甲醇洗脱，得23个组分，对每一组分用HepG2.2.15细胞模型进行活性筛选。 结果：毛诃子95％乙醇提取物具有抗HBV作用，对HBeAg治疗指数(TI)为2.2，对HBsAg治疗指数(TI)为2.9。其石油醚部位浓度在250μg／ml时为无毒浓度，对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg、HBsAg的抑制率分别为62.2％和54.0％，对HBeAg、HBsAg的治疗指数分别为3.5和2.0。其中第19组分对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg有抑制作用，第13组分对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg有抑制作用。 结论：发现藏药毛诃子的抗病毒作用，目前国内外尚无相关文献报道，有进一步研究开发价值。