电针治疗对脑梗塞患者血清蛋白质表达的影响

目的 利用二维凝胶电泳和质谱技术寻找并鉴定脑梗塞患者电针前后血清中表达差异的蛋白,探讨电针治疗能否通过调节血清中蛋白的变化来发挥治疗作用,为临床使用电针治疗脑梗塞提供理论依据。 方法 用多克隆抗体亲合柱(MARS)去除血清中的六种高丰度蛋白,通过二维凝胶电泳分离血清蛋白,Typhoon9200扫描仪获得凝胶图像,PDQuest图像分析软件选择脑梗塞患者电针前后血清图谱中的差异蛋白点,用MALDI-TOF-TOF串联质谱仪分析蛋白质,所得的质谱图通过GPS软件在MASCOT数据库中检索并鉴定蛋白质。最后利用Westernblotting进一步验证被二维电泳揭示的蛋白质的变化。 结果 1、建立了脑梗塞患者血清蛋白二维凝胶电泳图谱。 2、经PDQuest软件分析,差异大于2.5±0.5倍的蛋白点共50个,电针后高表达的蛋白点15个,低表达的35个。选取9个蛋白点,鉴定出9种蛋白,其中表达下调的蛋白是SerpinG1、A1BG(α-1B糖蛋白前体)和APOA4(脂蛋白A-4前体);上调的蛋白是Gelsolin(凝溶胶蛋白)、CFI(受体清道夫)、C3、C4B和APOH(β-2-糖蛋白前体),有2个蛋白点的鉴定结果都为APOH。用Western blotting进一步验证凝溶胶蛋白和丝胺酸蛋白酶抑制剂两种蛋白的变化,结果与二维凝胶电泳的一致。 结论 电针有可能通过下调血清中的SerpinG1、A1BG和APOA4及上调Gelsolin、CFI、C3、C4B和APOH,提高机体免疫力,促进细胞活化,抑制细胞凋亡,促进神经功能的恢复,这种多途径、多靶点的作用方式可能是电针治疗脑梗塞患者的重要机理之一。