云南红曲中主要活性成分的研究

红曲(Red Fermented Rice, RFR)由红曲霉(Monascus ruber)发酵制得,是我国传统的食药两用发酵产品,迄今已有上千年的应用历史,在这一千多年的历史中一直被广泛应用于食品着色、食品发酵、酿酒、中药等各个领域。近年来,全世界对红曲的药用功能空前关注,红曲的降血压、抗菌、降血氨、抗肿瘤、降血糖、调节血脂等诸多生理活性相继被发现,学者们对红曲的活性成分、作用机理等研究愈发深入。 本文对云南红曲中的活性成分进行研究。采用浸取分离、硅胶柱色谱、中性氧化铝柱色谱和薄层色谱等分离方法,从云南红曲中分离得到三种化合物,并利用多种波谱分析方法(质谱法、核磁共振光谱法、红外光谱法和高效液相色谱法等)对所得化合物进行结构分析和鉴定。它们分别为麦角甾醇(ergosterol,化合物1),洛伐他汀(lovastatin,化合物2),豆甾醇(stigmasterol,化合物3)其中豆甾醇是首次从红曲中大量分离得到。 本研究从400 g云南红曲中分离得到5.2 g豆甾醇,得率为13 mg/g,是发酵前底物中豆甾醇含量的433倍,文章对红曲中豆甾醇的产生进行了探讨。豆甾醇与洛伐他汀一样具有降脂活性,在红曲中豆甾醇的含量为洛伐他汀的2倍以上,由此可见,红曲降血脂、固醇的功能,不是由洛伐他汀独自完成的,豆甾醇在其中起着重要作用。 确定了麦角甾醇、洛伐他汀与豆甾醇的高效液相色谱检测方法,并进行了线性关系、精密度、稳定性、重复性、加样回收率等方法学考察。麦角甾醇HPLC检测的色谱条件为：Dionex Acclaim C18反相色谱柱(4.6×250 mm,5μm),流动相甲醇,流速1.0 ml/min,检测波长284 nm,柱温30℃；洛伐他汀HPLC检测的色谱条件为：Agilent Kromasil C18反相色谱柱(4.6×20.0 mm,5μm),流动相乙腈-甲醇-0.1%磷酸水(60：5：35),流速1.0 ml/min,检测波长238 nm,柱温30℃。利用确立的检测方法测得实验所用云南红曲样品中麦角甾醇的平均含量为1.049 mg/g,洛伐他汀的平均含量为7.2032 mg/g。 本文还对红曲中豆甾醇HPLC检测方法进行了探讨。选定色谱条件为：Dionex Acclaim C18 (4.6×250 mm,5μm)反相色谱柱,流动相甲醇,流速1.0 ml/min,检测波长210 nm,柱温30℃。此色谱条件下,标准曲线线性关系良好,但样品检测结果不理想,可能是红曲中存在某些会对豆甾醇检测造成干扰的物质,要除去这些干扰物质,使红曲中豆甾醇的HPLC检测有较好结果,样品的前处理方法还有待研究。