生物体内乙醇脱氢酶（ADH）的活力测定、分布及其与乙醇代谢动力学的关系

乙醇（alcohol）俗称酒精，是各种酒类饮料的主要成分，是世界范围内被普遍滥用的一种物质。由此造成了许多暴力死亡和交通事故的发生。在这些情况下都需对血液中的乙醇浓度（blood alcohol concentration，BAC）进行测定，而BAC的检测结果是正确处理与乙醇有关的事（案）件的主要依据。饮酒后BAC与乙醇代谢动力学密切相关，而乙醇代谢动力学参数又与乙醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase，ADH）的活力密切相关。 本研究采用了顶空-气相色谱（head space gas chromtography，HS-GC）条件测定ADH活力。对ADH的最适反应条件、反应终止液的浓度和用量、乙醇的相关物质进行了考察。实验结果表明ADH的最适反应条件为，最适pH值9．0，反应物乙醇的最适浓度为20．0mmol／L，反应物NAD的最适浓度为10．0mmol／L；最佳反应终止液为十二烷基磺酸钠。 应用前文的HS-GC法，以健康Wistar大鼠为实验动物，对不同实验组大鼠的乙醇代谢动力学进行了研究。结果表明，随着反复饮酒时间的延长，同空白组大鼠的药动学参数进行比较，实验组大鼠的（1）总消除速率常数、滞后时间、尿药排泄速率常数、清除率、吸收速率常数升高；（2）达峰时间、达峰浓度、药时曲线下面积降低。（3）最适房室数与权重变化不明显。 为了考察ADH在大鼠不同组织中的分布与活力变化规律，应用前文HS-GC测定方法，对各实验组大鼠的血清、肝脏，胃黏膜，及小肠组织中ADH活力进行了测定；并进行了统计学比较。实验结果表明，（1）随着饮酒时间的延长，大鼠小肠组织中ADH活力变化不明显；胃黏膜组织ADH的活力下降；肝脏组织中ADH活力上升；血清中ADH活力虽然也上升，但在初期变化不明显；（2）经统计学分析，每组的不同组织之间的ADH活力，无论总体、还是两两之间进行的比较，结果均有显著的统计学差异（P＜0．05）；胃黏膜、血清、肝脏三种组织在不同组之间进行总体比较时，有统计学显著差异（P＜0．05）；而小肠组织无统计学差异（P＞0．05）。 为了考察ADH与代谢动力学参数之间的关系，应用前文的HS-GC测定方法，测定了不经常饮酒与经常饮酒志愿者血清中ADH的活力，并整理本课题组已研究的代谢动力学资料，结果表明，志愿者血清中ADH活力和动力学参数的变化规律同实验组大鼠相似；找出其中变化规律相似的大鼠药动学参数，并将其与大鼠血清ADH活力值进行相关统计分析，结果表明，大鼠血清ADH活力值同总消除速率常数K、达峰浓度Cmax、药时曲线下面积AUC呈显著相关关系；同尿药排泄速率常数Ka相关关系不密切。在一定条件下，血清ADH的活力大小对代谢动力学参数有明显影响。 本课题利用顶空-气相色谱条件和酶活力测定终止法，测定了不同实验组大鼠的乙醇代谢动力学参数和其不同组织中的ADH的活力、以及这两者的变化规律、初步探讨了大鼠血清中ADH活力与代谢动力学参数之间的相关关系。为法医学实践中对乙醇代谢时的效性判断提供了重要参考。