水栒子果实天然活性物质的筛选及活性研究

本文对蔷薇科栒子属（Cotoneaster Medikus）植物水栒子（Cotoneastermultiflorus Bunge）果实中生物活性物质进行了初步筛选,通过对各粗提物的抗氧化及抗肿瘤活性的初步研究,目的是寻找天然抗肿瘤和抗氧化活性物质,为更好地开发这种广为分布的植物资源提供实验依据。 通过DPPH法、ABTS+法和邻苯三酚自氧化法对水枸子果实各相粗提物抗氧化活性进行测定,结果发现各相粗提物中均存在较高活性的抗氧化物质。乙酸乙酯相对自由基DPPH的清除活性最强EC50约为7.5μg/ml,水相EC50约为118.45μg/ml,石油醚相EC50约为174.34μg/ml。当剂量为50μg/ml时,乙酸乙酯相对自由基DPPH的清除活性已经达到91.86%,远远高于同等剂量下阳性对照BHA的清除活性78.26%。乙酸乙酯相对自由基ABTS+的清除活性也为最强EC50约为4.6μg/ml,水相EC50约为23.7μg/ml,石油醚相EC50约为26.1μg/ml。进一步以肝癌细胞株7721为材料,用MTT法进行体外抗肿瘤活性检测发现,乙酸乙酯相对细胞株的细胞毒效应最强,IC50为314.5μg/ml;石油醚相细胞毒效应IC50为387.3μg/ml;水相抗增殖能力最弱,IC50为512.7μg/ml。乙酸乙酯相的总多酚及总黄酮含量很高,与其高抗氧化活性相一致。 利用硅胶柱层析对水枸子果实乙酸乙酯相提取物进一步分离纯化,得到9个洗脱部分,其中洗脱剂为乙酸乙酯:石油醚=1:1的Fraction3部分显示出很高的抗氧化活性和一定的抗肿瘤活性。而且,Fraction3组分总多酚及总黄酮含量很高。抗氧化活性与总多酚、总黄酮之间有较高的相关性,暗示水枸子果实中起抗氧化作用的活性物质可能是总多酚及总黄酮类物质。 对活性较高的Fraction3和Fraction5两组分分别进行HPLC分析,Fraction3主要出现两个峰,主峰出峰时间为6.153min,Fraction5也主要出现两个峰,主峰出峰时间为5.264min。